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糖化血紅蛋白測定與影響因素的研究進展

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糖化血紅蛋白測定與影響因素的研究進展

  【摘要】糖化血紅蛋白(GHbA1c)水平的高低能夠對臨床患者的血糖控制程度進行可觀的反應,是臨床對患有糖尿病患者的血糖進行檢測和對其臨床治療效果進行評價的黃金標準。到目前為止臨床實驗室對該項指標水平進行檢測的有效方法總共有30余種,根據(jù)這些方法在檢測時的反應原理的不同,我們可以人為的將其分為兩大類,第一類是以機體內(nèi)的糖化血紅蛋白和非糖化血紅蛋白所帶的電荷不同為原理進行檢測的方法,第二類是以糖化血紅蛋白的結構特點為依據(jù)所進行檢驗的方法。本文對能夠對上述方法的檢測結果構成影響的相關因素進行綜述性介紹。

糖化血紅蛋白測定與影響因素的研究進展

  【關鍵詞】糖化血紅蛋白 影響因素 研究進展

  糖化血紅蛋白(GHbA1c)是對患者在3個月內(nèi)的機體平均血糖水平進行客觀反映的一項重要指標,與患有糖尿病的患者出現(xiàn)并發(fā)癥現(xiàn)象的危險有著十分密切的關系[1]。糖尿病是由遺傳和環(huán)境等因素相互作用而導致的一種臨床上比較常見的疾病,會導致患者的視網(wǎng)膜、腎、神經(jīng)等出現(xiàn)相應的病變及各種并發(fā)癥現(xiàn)象,在臨床上該類患者主要以高血糖現(xiàn)象為主要的臨床表現(xiàn),病情嚴重時可危及到患者的生命[2]。因此及早發(fā)現(xiàn)糖尿病跡象,及時進行有效的治療顯得尤為重要,對患者機體的糖化血紅蛋白水平進行測定對于該類患者的診斷和療效評價有著非常重要的意義[3]。根據(jù)糖化血紅蛋白檢測方法在檢測時的反應原理的不同,我們可以人為的將其分為兩大類,第一類是以機體內(nèi)的糖化血紅蛋白和非糖化血紅蛋白所帶的電荷不同為原理進行檢測的方法,第二類是以糖化血紅蛋白的結構特點為依據(jù)所進行檢驗的方法[4]。現(xiàn)對能夠對上述方法的檢測結果構成影響的相關因素進行綜述性介紹如下。

  一、檢驗方法

  GHb的測定方法的原理有多種: ① 根據(jù)GHb與Hb的電荷差異, 如離子交換層析、高效液相層析(HPLC) 、電泳和等電聚焦電泳; ② 根據(jù)Hb上糖化集團結構差異, 如親和層析、免疫測定法、離子捕獲法和酶法; ③ 化學分析,分光光度法、比色法。

  二、L-A1c對檢測的影響

  L-A1c是GHb在進行初期反應時所產(chǎn)生的一種產(chǎn)物, 結構不是十分穩(wěn)定, 會隨血糖濃度的變化而變化, 可水解為葡萄糖和Hb, 也可生成更穩(wěn)定的醛胺。該物質(zhì)不能對平均血糖的濃度進行反映, 但可對GHb的測定結果產(chǎn)生影響[5]。硼酸鹽親和色譜法和免疫法不對L-A1c進行檢測, 所以不會受其影響[6]。離子交換色譜法和電泳法受該物質(zhì)的影響相對較大, 有研究發(fā)現(xiàn)該物質(zhì)可使離子交換色譜法測定得到的GHb值比實際值高出1.5%左右[7]。最簡單去除該物質(zhì)的方法是將樣本用溶血劑進行處理, 將溶血產(chǎn)物在37攝氏度患者中孵育6個小時左右[8]。

  三、Hb變異體對檢測的影響

  HbF不會對離子交換色譜法和親和色譜法的檢測結果產(chǎn)生影響, 而免疫法易受到HbF的干擾。研究發(fā)現(xiàn)即使HbF濃度在15%以上, Bio-Rad VariantⅡ和Tosoh G7兩種離子交換層析柱也不會受到太大的影響[9]。但CLC330/385親和層析柱法的測定結果會比實際值低, 尤其當HbF在20%以上時, 測得的GHb值會下降1%左右甚至更多。該物質(zhì)對CLC330/385親和色譜法所產(chǎn)生的干擾比較到,可能是由于HbF的糖化速率相對較慢。HbF可以使DCA-2000免疫法的測定值較實際值低, 因為在HbF分子中HbA的β鏈被γ鏈所取代[10]。

  四、常見的化學衍生物對檢測結果的影響

  氨基甲酰Hb在患有尿毒癥的患者血液中的濃度會明顯升高, 是最常見的對GHb檢測結果造成干擾的化學衍生物[11]。尿素在患者體內(nèi)可自發(fā)形成氨和氰酸鹽化合物, 氰酸鹽經(jīng)過質(zhì)子化作用后可以形成異氰酸, 該產(chǎn)物與蛋白質(zhì)的α和ε氨基基團反應可以形成氨基甲酰。Hb的β鏈的N端上的纈氨酸與異氰酸發(fā)生結合反應形成氨基甲酰Hb[12]。該物質(zhì)與HbA1c的等電點比較相似, 故可對依據(jù)電荷原理對GHb的水平進行測定的方法形成一定的干擾。電泳法對氨基甲酰H b的反應非常敏感。在患者的體內(nèi), 氨基甲酰化的Hb的濃度如果在5.4%以上時,就會導致采用離子交換法測定得到的GHb值比真實偏高[13]。

  五、影響紅細胞生存時間的因素對檢測結果的影響

  GHb在患者的紅細胞內(nèi)的合成進程是連續(xù)進行的但是速度一般情況下比較緩慢,任何能夠導致機體內(nèi)的紅細胞壽命明顯縮短的一種疾病都會使GHb形成的時間顯著縮短, 使得檢測所得到的最終結果受到一定程度的影響。由于某些基礎性疾病多導致的繼發(fā)性溶血現(xiàn)象,往往會導致該項檢測所得到的最終結果明顯偏低, 例如患有肝硬化、脾腫大、糖尿病等疾病的患者。采用EPO進行治療及處于極度貧血狀態(tài)下的患者采用輸血的方法進行治療也會對GHb的檢測結果造成很大的影響[14]。測定方法不同對糖化血紅蛋白的檢測結果所產(chǎn)生的干擾也不同。

  維生素C和維生素E可對Hb的糖基化產(chǎn)生十分明顯的抑制效果, 使測定所得到的最終結果出現(xiàn)假性降低現(xiàn)象。相關研究結果顯示,患有缺鐵性貧血的患者在血糖的濃度相對恒定、紅細胞數(shù)顯著減少的情況下, GHb的測定值會顯著升高, 用鐵劑(100mg/d)對該類患者治療3個月之后, 由于幼紅細胞的出現(xiàn)使得Hb的濃度顯著降低, 可以使GHb平均值由7%左右下降至6.%左右[15]。 六、貯存溫度對檢測結果的影響

  樣本的貯存時間和貯存溫度及GHb測定的具體方法都與GHb的檢測結果有著密切的關系。隨著樣本貯存時間的不斷延長, 測定的結果也會隨之不斷升高。與其他的檢測方法相比, 離子交換色譜法和硼酸鹽親和色譜法在任何的溫度下的穩(wěn)定性都比較理想。大多數(shù)樣本都可在-70攝氏度的條件下保存1年左右, 檢測結果不會受到太大的影響。在4攝氏度時, 樣本可以保存1星期左右,在室溫的條件下, 樣本的穩(wěn)定性相對較差, 只能夠保存數(shù)天。

  綜上所述,任何與患者相關或實驗檢測相關的因素都可能影響GHbA1c檢測結果的準確性,從而影響對血糖控制水平及糖尿病慢性并發(fā)癥危險性的評估和治療方案的確定。因此在應用GHbA1c對血糖控制水平及糖尿病慢性并發(fā)癥危險性的評估時,臨床醫(yī)生應追問患者病史,結合其他生化指標以評估GHbA1c是否能準確反映患者的整體狀況,必要時采用糖化血清蛋白、糖化白蛋白以評估其血糖控制水平。

  參 考 文 獻

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