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解析馬齒筧多糖對潰瘍性結(jié)腸炎小鼠腸道的影響論文
潰瘍性結(jié)腸炎( ulcerative colitis，UC) 又稱慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎，是一種病因不明，反復(fù)發(fā)生腸道潰瘍，以腹瀉、黏液血便及腹痛為主要表現(xiàn)及侵犯直腸和結(jié)腸黏膜與黏膜下層為主的炎癥性病變。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，潰瘍性結(jié)腸炎常伴有腸道微生態(tài)的嚴重失調(diào)。馬齒筧多糖是中藥馬齒筧的提取物，近年來逐漸被重視和推廣。馬齒筧多糖是一種中藥益生元制劑，能調(diào)整菌群失調(diào)，尤其是對雙歧桿菌的生長有明顯的促進作用。本實驗擬研究馬齒筧多糖對UC 小鼠腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸及肝臟細菌易位的影響。
1 材料與方法
1. 1 實驗動物及主要試劑
昆明系清潔級小鼠，6～ 8 周，雌雄各半，體重18～ 22g，購于大連醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心[許可證號: SCXK( 遼) 2008 - 0002]。EMB 瓊脂培養(yǎng)基由北京奧博星生物技術(shù)責任有限公司提供。藥物硫酸葡聚糖鈉( DSS，分子量5000) 購于廣州齊云生物科技有限公司; 中藥馬齒筧由佳木斯大學(xué)藥店提供。馬齒筧多糖制備，使用的主要儀器: 島津GC - 14C 氣相色譜儀，厭氧培養(yǎng)箱。
1. 2 實驗動物分組及藥物治療
1. 2. 1 動物分組及模型制備: 清潔級昆明種小鼠50 只，隨機分成2 組，正常對照組20 只，模型組30只。模型組飲用5% 葡聚糖硫酸鈉( DSS) 蒸餾水7d，正常對照組飲用蒸餾水。造模第7d 結(jié)腸炎小鼠模型明顯地出現(xiàn)體重減輕、從糊狀便到液態(tài)血便、懶動等癥狀，證明造模成功，處死正常對照組小鼠10只、模型組小鼠10 只，取標本進行各種指標檢測。把造模后的模型組小鼠分為2 組: 自然恢復(fù)組( 陰性對照組) 、馬齒筧多糖治療組，每組各10 只小鼠。
1. 2. 2 中藥治療: 模型制備后，自然恢復(fù)組小鼠、正常對照組灌胃等量的生理鹽水。馬齒筧多糖治療組灌胃0. 5g /mL 的馬齒筧溶液0. 3mL，每天2 次，連續(xù)7d。7d 后處死小鼠，取標本進行相應(yīng)指標檢測。
1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法
采用SPSS17. 0 軟件進行統(tǒng)計分析，用平均值±標準差表示，P < 0. 05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2 結(jié)果
2. 1 各組小鼠腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸檢測
2. 1. 1 造模后，檢測了小鼠腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸，模型組小鼠與正常對照組比，腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸含量降低( P < 0. 05) 。
2. 1. 2 應(yīng)用馬齒筧多糖治療后，小鼠腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸發(fā)生明顯改變，與自然恢復(fù)組比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義( P < 0. 05)。
2. 2 各組小鼠肝臟細菌易位檢測
2. 2. 1 飲用DSS 后，模型組小鼠與正常對照組比，肝臟腸桿菌數(shù)量增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義( P < 0. 05) 。
2. 2. 2 馬齒筧多糖治療組小鼠肝臟腸桿菌數(shù)量發(fā)生明顯改變，與自然恢復(fù)組比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義( P < 0. 05)。
3 討論
本實驗用5% 葡聚糖硫酸鈉造模后，模型組小鼠出現(xiàn)從糊狀便到液態(tài)血便、懶動、體重減輕等癥狀，這些改變證明UC 模型造模成功。小鼠腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸含量明顯下降，肝臟有腸桿菌易位，證實UC 同時存在腸道菌群失調(diào)。UC 小鼠存在腸道細菌易位，腸道黏膜的改變促進細菌易位。目前研究認為，UC 的發(fā)病主要與遺傳因素、環(huán)境因素和免疫因素有關(guān)，且三種因素相互影響，相互作用。而腸道內(nèi)致病菌與正常菌群比例失調(diào)是觸發(fā)UC 發(fā)病的關(guān)鍵因素。腸道內(nèi)致病菌、條件致病菌增多，增多的細菌分泌的腸毒素使腸上皮細胞通透性增高，并形成大量的氧自由基，其在腸黏膜的損害中起重要作用。病菌分泌免疫抑制性蛋白，導(dǎo)致局部腸黏膜免疫耐受失衡，腸上皮細胞更易受到致病菌的侵襲而損傷。并且，某些過度生長的細菌導(dǎo)致上皮細胞受損傷，誘發(fā)腸道炎癥的發(fā)生。
腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸主要來源于厭氧菌對碳水化合物和未消化蛋白質(zhì)的發(fā)酵。厭氧菌是腸道揮發(fā)性脂肪酸的主要產(chǎn)生菌。模型組小鼠腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸降低，說明厭氧菌減少，小鼠出現(xiàn)菌群失調(diào)。UC小鼠應(yīng)用中藥馬齒筧多糖治療后小鼠基本狀態(tài)恢復(fù)良好: 糞便性狀正常、體重增加; 腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸增加，肝臟腸桿菌數(shù)量下降; 腸道菌群失調(diào)得到改善�？傊R齒筧多糖作為微生態(tài)調(diào)節(jié)劑可以增加小鼠腸內(nèi)容物揮發(fā)性脂肪酸及降低肝臟腸桿菌數(shù)量、調(diào)整腸道菌群失調(diào)，通過促進雙歧桿菌的生長達到抗炎作用，對UC 有一定的治療效果。中藥是祖國醫(yī)學(xué)之瑰寶，用馬齒筧多糖協(xié)助治療UC，有利于疾病的治愈。
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