基因工程畢業(yè)論文開(kāi)題報(bào)告

時(shí)間：2024-10-06 13:16:03 開(kāi)題報(bào)告我要投稿

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基因工程畢業(yè)論文開(kāi)題報(bào)告

　　論文(設(shè)計(jì))題目：農(nóng)桿菌介導(dǎo)的西瓜NPR1基因遺傳轉(zhuǎn)化

　　選題的意義：

　　西瓜為葫蘆科植物，是夏季重要水果。近年來(lái)，西瓜生產(chǎn)中病毒感染嚴(yán)重，影響產(chǎn)量和品質(zhì)。化學(xué)農(nóng)藥防治存在農(nóng)藥殘留問(wèn)題，所造成的環(huán)境問(wèn)題日益嚴(yán)重突出。因此選用生物工程技術(shù)選育抗病毒的良種已經(jīng)成為當(dāng)務(wù)之急，植物基因工程為抗病育種提供了新途徑。

　　研究的主要內(nèi)容：

　　1、查閱收集文獻(xiàn)資料，熟悉相關(guān)研究?jī)?nèi)容。

　　2、制訂出研究方案、實(shí)驗(yàn)方法。

　　3、對(duì)西瓜種子進(jìn)行浸染、共培養(yǎng)的時(shí)間的測(cè)定；

　　4、開(kāi)展不定牙分化、不定根生根的轉(zhuǎn)化率的測(cè)量；

　　5、試驗(yàn)在分化過(guò)程中不同激素濃度對(duì)分化過(guò)程的影響，并確定最佳濃度；

　　6、試驗(yàn)在分化過(guò)程中不同Hy篩選濃度對(duì)分化過(guò)程的影響，并確定其最佳濃度；

　　7、對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、結(jié)果做出分析、總結(jié)。

　　研究綜述(前人的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展情況)：

　　1992年Serrano等用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將hlaI基因轉(zhuǎn)入西瓜，轉(zhuǎn)化的西瓜在離體狀態(tài)下對(duì)Nacl產(chǎn)生較高抗性。

　　1991—1997年黃學(xué)森、彭學(xué)賢、萬(wàn)莉、王慧中等，將WMV的外殼蛋白基因?qū)胛鞴现仓�，獲得抗性材料，并獲農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)進(jìn)行安全釋放試驗(yàn)。

　　1997年肖光輝等采用DNA浸胚法，將外源瓜DNA導(dǎo)入西瓜，變異株的生長(zhǎng)勢(shì)明顯增強(qiáng)，而對(duì)照西瓜葉部病害較重。

　　1998年Chen-ShawChen等通過(guò)花粉管途徑將抗鐮刀枯萎并基因?qū)胛鞴限D(zhuǎn)化植株表現(xiàn)出枯萎的抗性。

　　1998年到2003年，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室、新加坡國(guó)立大學(xué)、山西金鼎種業(yè)公司合作，將WMVCP基因、ZYMV復(fù)制酶基因、CMV復(fù)制酶基因通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)，成功導(dǎo)入西瓜植株，經(jīng)溫室及大田抗病毒鑒定表明：其抗性達(dá)到中抗以上水平。

　　但尚未見(jiàn)有關(guān)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將NPR1基因轉(zhuǎn)入西瓜的報(bào)道。

　　擬采用的研究方法、步驟：

　　一、方法：農(nóng)桿菌介導(dǎo)法

　　二、步驟：

　　1、外植體(西瓜子葉)的獲得；

　　2、農(nóng)桿菌菌葉浸染子夜，置MS+6—BA1.0mg/L培養(yǎng)基、暗箱共培養(yǎng)2—3天；

　　3、無(wú)菌水清洗4次后，無(wú)菌紙吸干，置MS+6—BA1.0mg/L+Cef100mg/L+Hy培養(yǎng)基上誘導(dǎo)叢生牙的分化；

　　4、轉(zhuǎn)化牙轉(zhuǎn)入MS+6—BA+IBA+Cef+Hy培養(yǎng)基中成苗；

　　5、轉(zhuǎn)2.0CM高的苗于MS+6—BA+IBA+NAA1.0mg/L+Cef+Hy培養(yǎng)基中生根；

　　6、將已生根的無(wú)菌苗移致花盆中，一個(gè)月后轉(zhuǎn)入大田；

　　7、PCR檢測(cè)。

　　研究工作進(jìn)度安排：