怎么寫醫(yī)學(xué)生畢業(yè)論文
寫畢業(yè)論文主要目的是培養(yǎng)學(xué)生綜合運(yùn)用所學(xué)知識(shí)和技能，理論聯(lián)系實(shí)際，獨(dú)立分析，解決實(shí)際問(wèn)題的能力，使學(xué)生得到從事本專業(yè)工作和進(jìn)行相關(guān)的基本訓(xùn)練。以下是小編整理的醫(yī)學(xué)生畢業(yè)論文，歡迎閱讀。
篇一：醫(yī)學(xué)生畢業(yè)論文
現(xiàn)階段，因受到較多因素的影響，臂叢神經(jīng)損傷的患者越來(lái)越多，外科醫(yī)生必須對(duì)臂叢解剖學(xué)有所了解，才能夠進(jìn)一步了解患者病情，找出更好的治療方法。在胚胎時(shí)期，臂叢構(gòu)成同肌肉轉(zhuǎn)移、血管形成存在很大關(guān)聯(lián)，因此可產(chǎn)生束、股、干、根等變異。臂叢神經(jīng)變異的發(fā)生率較高，且變異形式越來(lái)越復(fù)雜。本文主要分析臂叢神經(jīng)變異的應(yīng)用解剖學(xué)，現(xiàn)將報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1一般資料
選取52具（104側(cè)）成人防腐尸體標(biāo)本作為研究對(duì)象，男32具，女20具，年齡32~59歲，平均（42.18±5.29）歲，平均身長(zhǎng)（178.65±2.65）cm,所有腐尸均無(wú)明顯畸形癥狀。
1.2一般方法
仔細(xì)解剖患者臂叢神經(jīng)部位，并臂叢組成部分進(jìn)行鑒別，明確其變異的具體情況，分析左右、男女側(cè)交通支變異的發(fā)生率。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
數(shù)據(jù)采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x珔±s）表示，采用t檢驗(yàn)，對(duì)計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1臂叢變異發(fā)生情況
在50具（104側(cè)）尸體中，出現(xiàn)臂叢神經(jīng)變異18側(cè)，發(fā)生率為17.3%.正常臂占82.7%.左側(cè)臂叢變異者12具（66.7%），男6具，女6具。右側(cè)臂叢變異6具（33.3%），男4具，女2具。左側(cè)臂叢變異發(fā)生率明顯高于右側(cè)臂叢發(fā)生率，對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
2.2干的變異
通過(guò)解剖得知，有4側(cè)屬于雙干型變異，下干為T1、C8,上干由C5、C6、C7融合而成。1側(cè)四干型變異，C5、C6屬于單獨(dú)成干，外側(cè)束由C5、C6前股結(jié)合而成。有3側(cè)三干型變異，中干由C7、C8合成，內(nèi)側(cè)束與下干由T1單獨(dú)構(gòu)成。
2.3股的變異
有2側(cè)中干雙前股，外側(cè)束由上干前股與外前股匯合而成，內(nèi)側(cè)束由內(nèi)前股形成。有1側(cè)下干雙前股，外側(cè)束由中上干前股與外前股合成，內(nèi)側(cè)束由內(nèi)前股形成。有2側(cè)下干無(wú)后股。
2.4束的變異
有3側(cè)單束型變異，上中下干合成一束，發(fā)出分支神經(jīng)。有3側(cè)雙束型變異。
3 討論
3.1臂叢神經(jīng)的組成
本文50具尸體中，共有100側(cè)臂，通過(guò)本次 研 究 發(fā) 現(xiàn)，出 現(xiàn) 臂 叢 神 經(jīng) 變 異18側(cè)，發(fā) 生 率 為17.3%,正常臂占82.7%.現(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)外存在很多與之相關(guān)的報(bào)道，不過(guò)在臂叢神經(jīng)變異的統(tǒng)計(jì)結(jié)果上，卻存在一定差異。
臂叢神經(jīng)的組成較為復(fù)雜，它由C5、C6、C7、C8神經(jīng)（頸神經(jīng)）與T1（第1胸神經(jīng)前支）組成。各束于喙突平面有神經(jīng)支分出，外側(cè)束主要由正中神經(jīng)外側(cè)頭與肌皮神經(jīng)外側(cè)頭組成，內(nèi)側(cè)束由正中神經(jīng)內(nèi)側(cè)頭與尺神經(jīng)內(nèi)側(cè)頭組成。后束由橈神經(jīng)于腋神經(jīng)組成[1].正中神經(jīng)外側(cè)頭與內(nèi)側(cè)頭于腋動(dòng)脈的兩側(cè)至其前方組成正中神經(jīng)。正中神經(jīng)的組成部分較多，其中包括外側(cè)束、內(nèi)側(cè)束正中神經(jīng)的外側(cè)頭、內(nèi)側(cè)頭。尺神經(jīng)源于臂叢內(nèi)側(cè)束，橈神經(jīng)源于后束。
3.2臂叢神經(jīng)變異的相關(guān)研究
曾經(jīng)有研究表明，在200側(cè)胎兒臂中，有103側(cè)存在臂叢神經(jīng)變異的情況[2].本次的研究對(duì)象均為成年人，與相關(guān)研究結(jié)果也存在一定差異，這可能與研究對(duì)象的年齡和例數(shù)相關(guān)。
經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，下干雙前股僅有1側(cè)，當(dāng)上干受損后，部分區(qū)域可能也還有功能存在，使原有癥狀減輕，在神經(jīng)移位修復(fù)過(guò)程中，此類變異形式需對(duì)其損傷進(jìn)行辨別，值得注意的是，在明確動(dòng)力神經(jīng)纖維不足的條件下，需更加重視這一點(diǎn)。
除此之外，從研究結(jié)果中還得知，左側(cè)臂叢變異發(fā)生率明顯高于右側(cè)臂叢發(fā)生率，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。因此，在臨床診斷過(guò)程中，也要關(guān)注到這一點(diǎn)。
在解剖過(guò)程中，我們能夠發(fā)現(xiàn)，臂叢神經(jīng)受到損害后，可能會(huì)產(chǎn)生交感神經(jīng)紊亂現(xiàn)象，這種癥狀在肢體上主要呈現(xiàn)為汗腺分泌障礙（如患者流汗量減少或無(wú)汗）、皮膚菲薄、潰瘍、骨質(zhì)疏松、肌萎縮等。交感神經(jīng)受到刺激后，會(huì)誘發(fā)小動(dòng)脈收縮，減少神經(jīng)內(nèi)血流。神經(jīng)血供減少后，會(huì)對(duì)神經(jīng)造成很大影響，若頸部交感神經(jīng)在長(zhǎng)時(shí)間段內(nèi)，保持興奮狀態(tài)，則會(huì)損害臂叢神經(jīng)。
3.3臂叢神經(jīng)變異的治療與注意事項(xiàng)
在頸椎手術(shù)過(guò)程中，若醫(yī)生未完全掌握解剖知識(shí)，則可能會(huì)導(dǎo)致患者身體受損。在這類手術(shù)中，必須保護(hù)C7、C8分支交分布特征與交通支，防止患者受到損傷[3].臂叢神經(jīng)受損后，患者不僅需要接受手術(shù)治療，還需實(shí)施有效的康復(fù)護(hù)理，定時(shí)對(duì)患者的血壓、呼吸、脈搏、體溫等指標(biāo)進(jìn)行檢查，患者可適度抬高其患肢部位，保持功能位。
利用毛巾、紗布將擦拭患側(cè)，減少皮膚刺激，同時(shí)也便于觀察皮膚的變化情況。著重觀察患者皮膚的溫度、顏色與腫脹情況，一旦發(fā)現(xiàn)異常后，需及時(shí)告知醫(yī)生。臂叢神經(jīng)變異患者需經(jīng)�；顒�(dòng)患肢手指，否則關(guān)節(jié)部位可能會(huì)僵化，接受治療后，還需根據(jù)醫(yī)囑，使用神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)藥物，這對(duì)于神經(jīng)再生具有促進(jìn)作用。
臂叢變異的發(fā)生率非常高，且變異形式表現(xiàn)多樣，變異臂叢會(huì)對(duì)神經(jīng)根性支配產(chǎn)生影響，使其出現(xiàn)變化，若對(duì)變異狀況不了解，則難以準(zhǔn)確診斷患者疾病。臂叢神經(jīng)極有可能產(chǎn)生原發(fā)性（或者續(xù)發(fā)性）損傷，明確各神經(jīng)于階段分布的具體情況后，有利于及時(shí)診斷、調(diào)查臂叢神經(jīng)損傷情況[4].在外科修復(fù)手術(shù)過(guò)程中，需對(duì)解剖構(gòu)成變異作出準(zhǔn)確判斷，并根據(jù)患者的具體病情，選擇合理的手術(shù)治療方式，這對(duì)于患者疾病的好轉(zhuǎn)具有重要意義。
參考文獻(xiàn)
[1] 吳海鈺，王樹(shù)鋒.CTM顯示椎管內(nèi)臂叢神經(jīng)前后根的應(yīng)用解剖學(xué)研究[J].中國(guó)矯形外科雜志，2005,13（10）:753-756.
[2] 張樹(shù)明，王長(zhǎng)江等.臂叢神經(jīng)變異伴鏡像右位心1例[J].軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào)，2010,31（8）:842-843.
[3] 趙旸，種皓，周雁.超聲引導(dǎo)神經(jīng)刺激器定位腋入路臂叢神經(jīng)肌皮神經(jīng)解剖變異的研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2013,10（21）:4-8.
[4] 向前生，楊俊濤，劉冠蘭，等.健側(cè)C7神經(jīng)經(jīng)椎體后通路治療臂叢神經(jīng)根性撕脫傷的解剖學(xué)研究[J].中國(guó)修復(fù)重建外科雜志，2012,26（2）:235-237.
篇二：醫(yī)學(xué)生畢業(yè)論文
內(nèi)皮祖細(xì)胞（endothelial progenitor cells,EPCs）是一群存在于臍帶血、成人骨髓和外周血、能增殖分化為成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞的幼稚細(xì)胞。該類細(xì)胞不僅參與胚胎期血管生成，同時(shí)也在出生后血管新生和損傷血管修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用[1].大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和早期臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，EPCs 移植可促進(jìn)機(jī)體損傷部位新生血管的形成和受損血管的再內(nèi)皮化，加快組織或器官的再生和功能恢復(fù)[2-4].近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，移植到體內(nèi)的 EPCs 不是通過(guò)自身增殖分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞參與血管新生和組織再生，而主要是通過(guò)旁分泌機(jī)制動(dòng)員、激活內(nèi)源性內(nèi)皮細(xì)胞和其他相關(guān)細(xì)胞參與組織修復(fù)[1,4-6].
胞外囊泡（extracellular vesicles,EVs）是細(xì)胞旁分泌的生物活性物質(zhì)之一，在細(xì)胞間信息傳遞過(guò)程中扮演著極為重要的角色[7-8].在 EVs 的形成過(guò)程中，會(huì)選擇性地分揀、富集與來(lái)源細(xì)胞相關(guān)的蛋白質(zhì)、mRNAs 和 微 小 RNAs（micro RNAs,miRNAs）等信號(hào)分子，這些信號(hào)分子在 EVs 與靶細(xì)胞相互作用后被釋放到靶細(xì)胞中，并在靶細(xì)胞中繼續(xù)發(fā)揮功能[7-8].近年已有不少研究報(bào)道 EVs 具有類似于干 /祖細(xì)胞的組織修復(fù)功能[9-11],但目前有關(guān) EPCs 源性EVs（EPC-EVs）的研究尚處于初期階段。本文主要就 EPC-EVs 的生物學(xué)特性、分離純化和功能方面的相關(guān)研究進(jìn)行綜述。
1 EPC-EVs 的生物學(xué)特性
EVs 是指由細(xì)胞來(lái)源的脂質(zhì)雙分子層包繞的球囊狀結(jié)構(gòu)，包括微泡（microvesicles,MVs）和外泌體（exosomes），二者具有不同的生物學(xué)特征，其主要區(qū)別在于形成方式和直徑大小[7].MVs 又稱脫落小體、微粒體，早在 1946 年 Chargaf 等[12]就提出了這一概念。MVs 是細(xì)胞直接由胞質(zhì)膜出芽、脫落而釋放到細(xì)胞外環(huán)境中的膜性小囊泡，透射電鏡下觀察其形態(tài)不均一，直徑通常在 100 ~ 1 000?nm,但也可 能 >1?μm 或<100 nm[7].1981 年 Trams 等[13]在利用透射電鏡測(cè)量正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞的 MVs 時(shí)，發(fā)現(xiàn)除了一群直徑為 500 ~ 1 000 nm 的小囊泡（即MVs）外，還存在另外一群更小的囊泡狀物質(zhì)，其平均直徑為 40 nm.6 年后，Johnstone 等[14]將這種直徑 <100?nm 的膜性囊泡正式命名為 exosomes.
Exosomes 起 源 于 細(xì) 胞 內(nèi) 多 泡 體（multivesicularbodies,MVBs），在 MVBs 與細(xì)胞膜融合后被分泌到細(xì)胞外基質(zhì)中[7,15];同源性 exosomes 形態(tài)均一、大小相近，不同來(lái)源的 exosomes 直徑可以不同，但基本介于 40 ~ 100?nm[7,15-17].
然而，目前有關(guān) exosomes 與 MVs 的命名經(jīng)�；煜�，有些研究者甚至將二者混為一談[18].如關(guān)于 EPCs 源性 MVs 的研究中，有較多研究者在定義MVs 時(shí)采用的是 exosomes 的概念，但在鑒定這些“MVs”表型時(shí)采用的不是 exosomes 的特定標(biāo)志物，而是 MVs 的常規(guī)標(biāo)志物，混淆了 MVs 和 exosomes的概念和特征。這些研究分離純化所得的“MVs”直徑多為 60 ~ 160?nm[19-22],由于在該直徑范圍中的囊泡包括 MVs 和 exosomes,故這些“MVs”很可能是兩種囊泡的混合物。也有部分研究者分離所得的EPCs源性 MVs 直徑在 100 ~ 500 nm[23]或 1 μm 左右[24],這更符合 MVs 的特點(diǎn)。目前尚無(wú)研究明確報(bào)道EPCs 源性 exosomes 的特性，但已有研究者初步探究了 CD34+干細(xì)胞群（EPCs 是該干細(xì)胞群中的一類細(xì)胞）來(lái)源的 exosomes 的相關(guān)特點(diǎn)。Sahoo 等[25]從成人外周血中分選出 CD34+干細(xì)胞群，并在培養(yǎng)上清中分離得到了大量 exosomes,其直徑為 40 ~ 60nm.提示人外周血源性 EPCs 分泌的 exosomes 直徑也可能在該范圍內(nèi)。
除了透射電鏡觀察外，表面標(biāo)志物檢測(cè)是鑒定exosomes 和 MVs 的另一必不可少的`環(huán)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，某些蛋白質(zhì)（如 CD9、CD63、CD81 和 TSG101等）在各種細(xì)胞來(lái)源的 exosomes 上均有分布，它們?cè)?exosomes 的形成、釋放等過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用[7].因而研究者將這些蛋白質(zhì)作為 exosomes 的通用標(biāo)志物應(yīng)用于相關(guān)鑒定中。然而，目前研究者尚未發(fā)現(xiàn) MVs 表面的特定標(biāo)志物，其脂質(zhì)成分、膜蛋白的組成和密度還有待進(jìn)一步研究[7].現(xiàn)階段主要用 L-選擇素、整合素α4和β1等非特異性分子作為標(biāo)志物，這些分子在 MVs 與靶細(xì)胞的相互作用過(guò)程中扮演重要角色[7,19-22,24,26-27].研究表明，exosomes 和 MVs中還含有與來(lái)源細(xì)胞相關(guān)的特異性蛋白質(zhì)、核酸等成分。如 CD34+干細(xì)胞群分泌的 exosomes 表達(dá)CD34 蛋白分子[25];EPCs 源性 MVs 表達(dá)其來(lái)源細(xì)胞 EPCs 的特異性標(biāo)志物（如 CD31、CD34 和 VEGF受體 2 等），而不表達(dá)血小板相關(guān)標(biāo)志物 P- 選擇素和 CD42b 以及單核細(xì)胞標(biāo)志物 CD14[19-24,26-27];此外，EPCs 源性 MVs 還富集了 EPCs 的血管新生相關(guān)mRNAs 和 miRNAs 等[19-24,26-27].
2 EPC-EVs 的分離純化
目前，大部分研究者主要從 EPCs 的培養(yǎng)上清液（也稱條件培養(yǎng)基）中提取 EPC-EVs[19-24,26-27].為了避免血清源性 EVs 的影響，研究者通常會(huì)在收集EPCs 條件培養(yǎng)基的前一天更換 EPCs 培養(yǎng)基中的血清，使其在無(wú)血清狀態(tài)下生長(zhǎng) 24 h,然后再收集細(xì)胞上清液。也有少數(shù)研究者為了探究外周血中EPC-EVs 的相關(guān)特性，直接從血漿標(biāo)本中提取 EPC-EVs[28-29].為獲得純度較高的EPC-EVs,研究者會(huì)在分離 EPC-EVs 前將所得血漿標(biāo)本進(jìn)行離心（11 000×g、2?min 或 3 000×g、15 min），以去除混雜其中的大量血小板[28-29].
現(xiàn)階段用于分離純化 EVs 的方法有差速離心法、密度梯度離心法、微孔過(guò)濾技術(shù)、免疫磁珠分選和商品化試劑盒等，其中以差速離心法最為高效[7],成為提純 EPC-EVs 的常用方法。其步驟大致如下[18,30-32]:①收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液，2?000×g 離心20?min,以去除上清液中的死亡細(xì)胞和細(xì)胞碎片；②以（10 000 ~ 20 000）×g 離心 30 min,得到體積較大的囊泡，即MVs;③將經(jīng)步驟②離心所得的上清液以100 000×g 離心 60 min,即得體積較小的囊泡，主要為exosomes.若想獲得較高純度的 exosomes 或 MVs,可在離心后將沉積物用大量 PBS 重懸，然后重復(fù)超速離心1次，最后將所得沉積物重懸在PBS中.全程均在 4℃條件下進(jìn)行，所得的 exosomes 或 MVs置于 -?80°C 保存?zhèn)溆肹18,30-32].值得注意的是，在與EPC-EVs 相關(guān)的大量研究中，研究者將經(jīng)步驟③所得到的囊泡稱作 MVs[19-24,26],而非 exosomes.這可能是由于研究者將 MVs 和 exosomes 的概念混淆所致。也有研究者將經(jīng) 100 000×g 離心后所得沉積物直接稱為 EVs[27].由于經(jīng)超速離心后所得 exosomes的純度并不是非常高，也可能會(huì)含有一部分體積偏小的 MVs[18],因而這樣命名更準(zhǔn)確。為此，下文綜述EPCs 來(lái)源的 MVs 或 exosomes 功能時(shí)均將其統(tǒng)稱為EPC-EVs.
3 EPC-EVs 的功能
3.1 EPC-EVs 與缺血性損傷修復(fù)
組織缺血可導(dǎo)致相應(yīng)器官功能障礙，甚至功能衰竭。EPCs移植可促進(jìn)損傷區(qū)血管新生和內(nèi)皮修復(fù)，從而加速組織再生和功能恢復(fù)。但細(xì)胞直接移植存在一定風(fēng)險(xiǎn)，如異常分化、血管栓塞等。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，EPC-EVs 富集了其來(lái)源細(xì)胞 EPCs 的功能性RNAs,具有與 EPCs 類似的促血管再生和組織修復(fù)功能[19-21,26].
Deregibus 等[24]發(fā)現(xiàn)人外周血源性 EPC-EVs中含有與磷脂酰肌醇 -3- 激酶（phosphatidylinositol3-kinase,PI3K）/Akt（v-akt murine thymoma viraloncogene homolog）/ 內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothe-lial nitric oxide synthase,eNOS）信 號(hào) 通 路 相 關(guān) 的mRNAs;將其與人微血管內(nèi)皮細(xì)胞共同孵育一段時(shí)間后，內(nèi)皮細(xì)胞的增殖活性和成血管能力增強(qiáng)，PI3K/Akt/eNOS 信號(hào)通路被激活；若采用 RNA 酶作用于 EPC-EVs,或采用 PI3K 或 NOS 抑制劑作用于內(nèi)皮細(xì)胞后，EPC-EVs 對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的促成血管能力則明顯降低。該研究提示 EPC-EVs 可能通過(guò)靶向傳遞 PI3K/Akt/eNOS 信號(hào)通路相關(guān) mRNAs,促使原本處于靜止期的內(nèi)皮細(xì)胞“獲得性”高表達(dá)該信號(hào)通路的關(guān)鍵分子，進(jìn)而觸發(fā)內(nèi)皮細(xì)胞的一系列促血管生成反應(yīng)。近年來(lái)，已有研究者對(duì)人外周血來(lái)源的 EPC-EVs 在下肢缺血性損傷、腎臟缺血再灌注損傷和胰島移植后缺血缺氧性損傷中的作用進(jìn)行了探究。Ranghino 等[19]將 EPC-EVs 移植至下肢缺血的免疫缺陷型小鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)小鼠缺血后肢的毛細(xì)血管密度和血流灌注均增加，肌肉壞死程度較用等體積內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基處理的對(duì)照組明顯減輕，且有明顯的肌組織再生。Cantaluppi 等[20]將 EPC-EVs 經(jīng)尾靜脈注射至腎缺血再灌注損傷的大鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)在 EPC-EVs 移植后第 2 天，損傷大鼠的血尿素氮、血肌酐水平即出現(xiàn)明顯下降；組織學(xué)結(jié)果顯示，EPC-EVs 可明顯增強(qiáng)腎小管上皮細(xì)胞和管周血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、自我修復(fù)和抗凋亡能力，減少損傷腎組織內(nèi)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，并能抑制損傷區(qū)腎小管周圍毛細(xì)血管減少、腎小球硬化和腎小管間質(zhì)性纖維化等；此外，該研究組還發(fā)現(xiàn) EPC-EVs 具有促進(jìn)胰島移植后血管重建的能力。胰島移植后的早期缺血缺氧是導(dǎo)致大量胰島死亡的主要原因，因而迅速、充分的再血管化對(duì)于移植胰島的存活及功能至關(guān)重要。
Cantaluppi 等[21]發(fā)現(xiàn) EPC-EVs 能促進(jìn)胰島內(nèi)皮細(xì)胞從胰島細(xì)胞團(tuán)內(nèi)爬出，并可增強(qiáng)其增殖、遷移、成血管和抗凋亡的能力；EPC-EVs 還能干擾炎性細(xì)胞與胰島內(nèi)皮細(xì)胞的黏附反應(yīng)，表明 EPC-EVs 對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞介導(dǎo)的炎性反應(yīng)具有抑制作用；研究者將 EPC-EVs 和 Matrigel 包裹的新鮮胰島經(jīng)皮下注射至免疫缺陷型小鼠的頸背部，發(fā)現(xiàn) EPC-EVs 可加速移植胰島的早期血管化、提高其存活能力和改善分泌功能。
經(jīng)進(jìn)一步分析，研究者發(fā)現(xiàn) EPC-EVs 含有與增殖、抗凋亡和血管新生密切相關(guān)的 miRNAs（如 miR-126 和 miR-296）[19-21,26].若在移植前先將 EPCs 中miRNAs 合成相關(guān)基因 Dicer 敲除或抑制 EPCs 中miR-126 和 miR-296 的表達(dá)，使其分泌的 EVs 不含這些 miRNAs,或采用 RNA 酶作用于 EPC-EVs 后，EPC-EVs 對(duì)缺血組織的修復(fù)作用則顯著減弱甚至消失[19-21,26],表明 EPC-EVs 主要通過(guò)靶向傳遞這些關(guān)鍵 miRNAs 發(fā)揮對(duì)缺血性損傷組織的修復(fù)功能。
3.2 EPC-EVs 與系膜增生性腎炎修復(fù)
抗 hy-1 腎炎又稱抗胸腺細(xì)胞血清性腎炎，是經(jīng)典的系膜增生性腎炎模型，主要表現(xiàn)為補(bǔ)體依賴的系膜細(xì)胞溶解、系膜細(xì)胞異常增生、彌漫性炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和內(nèi)皮細(xì)胞損傷等[33].Cantaluppi 等[27]將EPC-EVs 經(jīng)股靜脈注射至抗 hy-1 腎炎損傷的大鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)大鼠蛋白尿水平明顯降低，肌酐清除率顯著升高；組織學(xué)結(jié)果顯示，大鼠腎組織病理改變明顯減輕，表現(xiàn)為系膜細(xì)胞溶解和凋亡減少、內(nèi)皮細(xì)胞損傷和炎性反應(yīng)減輕等；經(jīng)透射電鏡和免疫組織化學(xué)染色觀察，研究者發(fā)現(xiàn) EPC-EVs 可抑制系膜區(qū)補(bǔ)體復(fù)合物的沉積和系膜細(xì)胞平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)，表明 EPC-EVs 可減輕系膜細(xì)胞損傷并抑制其活化；再者，EPC-EVs 還可減少足細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的損傷和丟失，有助于維持腎小球?yàn)V過(guò)屏障的完整性；補(bǔ)體總活性測(cè)試結(jié)果表明，EPC-EVs 還可明顯降低大鼠血清補(bǔ)體的溶血活性。然而，成纖維細(xì)胞源性 EVs則沒(méi)有上述修復(fù)作用，可見(jiàn) EPC-EVs 攜帶某些獨(dú)特成分且這些成分對(duì) EPC-EVs 修復(fù)抗 hy-1 腎炎不可或缺。研究者進(jìn)一步探究了 EPC-EVs 修復(fù)抗 hy-1腎炎的機(jī)制。經(jīng)成分分析，研究者發(fā)現(xiàn) EPC-EVs 中含有促血管新生 miRNAs（miR-126 和 miR-296）以及補(bǔ)體活化抑制因子（包括補(bǔ)體因子 H、CD55 和CD59）的 mRNAs 和蛋白質(zhì)；將 EPC-EVs 作用于抗hy-1 抗體損傷的大鼠系膜細(xì)胞后，系膜細(xì)胞增殖、抗凋亡能力提高，補(bǔ)體復(fù)合物的沉積減少，補(bǔ)體活化抑制因子的表達(dá)水平明顯升高；而采用 RNA 酶作用于 EPC-EVs 后，上述效應(yīng)則消失。由此可見(jiàn)，EPC-EVs 富集的這些功能性物質(zhì)使得其在治療補(bǔ)體介導(dǎo)的系膜增生性腎炎上具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。
3.3 EPC-EVs 與心肌肥厚修復(fù)
心肌肥厚是心肌工作超負(fù)荷的一種適應(yīng)性反應(yīng)，主要表現(xiàn)為心肌細(xì)胞肥大、凋亡和間質(zhì)細(xì)胞增生及纖維化，是多種心血管疾病的發(fā)展基礎(chǔ)。研究表明，局部過(guò)量血管緊張素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，Ang- Ⅱ）可誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大、凋亡和氧化應(yīng)激損傷，進(jìn)而引起心肌重構(gòu)[34].Gu 等[22]報(bào)道，在 Ang- Ⅱ誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大、凋亡反應(yīng)中，小鼠骨髓源性 EPC-EVs 可通過(guò)向心肌細(xì)胞傳遞功能性 RNAs 增強(qiáng)心肌細(xì)胞的增殖活性和抗凋亡能力，并抑制心肌細(xì)胞活性氧的產(chǎn)生，而這一保護(hù)作用可能與 EPC-EVs 激活心肌細(xì)胞 PI3K/Akt/eNOS 信號(hào)通路密切相關(guān)。該研究結(jié)果表明，EPC-EVs 還具有修復(fù)心肌肥厚的潛能。
3.4 EPC-EVs 對(duì)心血管疾病的預(yù)測(cè)價(jià)值
外周血中 EPCs 數(shù)量降低可獨(dú)立預(yù)測(cè)心腦血管疾病的病程和預(yù)后[35].研究表明，EPC-EVs 也具有預(yù)測(cè)心腦血管疾病的作用[28-29].研究者發(fā)現(xiàn)，外周血中 EPC-EVs 的水平與各種心腦血管危險(xiǎn)因素（如高血壓、糖尿病等）成正相關(guān)[28-29].動(dòng)脈硬化通常被認(rèn)為是多種心腦血管危險(xiǎn)因素對(duì)血管壁損害的綜合表現(xiàn)，是血管病變的特異性和敏感性標(biāo)志，臨床上常采用主動(dòng)脈脈搏波傳導(dǎo)速度（aortic pulse wave veloc-ity,aPWV）反映動(dòng)脈硬度。Pirro 等[28]發(fā)現(xiàn)，外周血中 EPC-EVs 的水平與 aPWV 成顯著正相關(guān)，提示EPC-EVs 水平升高能預(yù)測(cè)動(dòng)脈硬化進(jìn)程和衡量疾病嚴(yán)重程度。糖尿病是缺血性腦卒中的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素。Chen 等[29]發(fā)現(xiàn)，糖尿病小鼠外周血中 EPC-EVs 的基礎(chǔ)水平明顯偏高，并與小鼠血糖濃度和小鼠腦卒中后的梗死面積成正相關(guān)，與腦微血管密度成負(fù)相關(guān)。由此可見(jiàn)，EPC-EVs 水平升高對(duì)腦缺血損傷的預(yù)后也具有預(yù)測(cè)作用。
值得注意的是，有研究發(fā)現(xiàn)當(dāng) EPCs 受損、凋亡時(shí)，所釋放的 EVs 在數(shù)量、成分和功能上有所改變。
Pirro 等[28]將 EPCs 置于過(guò)氧化氫介導(dǎo)的促凋亡環(huán)境或高膽固醇患者的血清中培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn) EPCs 凋亡比例和 EPC-EVs 生成明顯增加，表明不利刺激能加速EPC-EVs 的產(chǎn)生。Wang 等[23]報(bào)道，在普通無(wú)血清環(huán)境下培養(yǎng)的 EPCs 所分泌的 EVs（starving stress,sEPC-EVs）富含血管新生相關(guān) miRNA（miR-126），而在 TNF-α 介導(dǎo)的促凋亡環(huán)境下生長(zhǎng)的 EPCs 所釋放的 EVs（apoptotic stress,aEPC-EVs）則富集了與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)的半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶 3 的 mRNAs;研究者將這兩種類型的 EPC-EVs作用于因氧化應(yīng)激損傷的人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞，發(fā)現(xiàn) sEPC-EVs 可抑制內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡和活性氧的產(chǎn)生、增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞的成血管能力，而 aEPC-EVs 卻能加速內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡、加劇內(nèi)皮細(xì)胞的功能障礙和氧化應(yīng)激損傷。Chen 等[29]發(fā)現(xiàn)，糖尿病小鼠外周血中的 EPC-EVs 可降低正常 EPCs 的遷移和成血管能力，減弱甚至消除 EPCs 對(duì)小鼠腦缺血損傷的修復(fù)作用。這些研究提示，因各種不利刺激（如高血糖、高膽固醇等）的作用而異常增多的 EPC-EVs 在內(nèi)皮細(xì)胞損傷和功能障礙中扮演重要角色，可能成為血管相關(guān)性疾病治療的新靶點(diǎn)。
4 展望
EVs 作為一種新發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞間信息傳遞途徑，已成為當(dāng)前研究熱點(diǎn)。然而目前有關(guān) EPC-EVs 的研究尚處于初期，存在諸多問(wèn)題需要進(jìn)一步探究和解決。
如缺乏快速、經(jīng)濟(jì)、高效和標(biāo)準(zhǔn)化的分離方法和技術(shù)；EPC-EVs 中富集的促血管新生 miRNAs 所調(diào)節(jié)的靶細(xì)胞 mRNAs 尚不明確；EPC-EVs 靶向傳遞功能性蛋白質(zhì)和 RNAs 時(shí)，是否具有受體細(xì)胞選擇性；靜脈注射的 EPC-EVs 是通過(guò)何種分子機(jī)制被募集到損傷組織；不同狀態(tài)下，EPC-EVs 的形成機(jī)制是否存在差異，所含組分和功能上有哪些不同；如何清除心腦血管病患者外周血中的病理性 EPC-EVs 等。這些問(wèn)題都需體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)以及臨床研究予以解釋和證實(shí)。
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