探討滇白珠水提物對(duì)COPD氧化應(yīng)激的影響

　　超氧化物歧化酶是機(jī)體清除超氧陰離子惟一的抗氧化酶，在一定程度上表示了機(jī)體的抗氧化能力，下面是小編搜集整理的一篇探究滇白珠水提物對(duì)COPD氧化應(yīng)激影響的論文范文，供大家閱讀參考。

　　目前認(rèn)為，慢性阻塞性肺疾病(COPD)的發(fā)病機(jī)制與氣道炎癥有關(guān)，同時(shí)蛋白酶-抗蛋白酶失衡、氧化-抗氧化失衡亦起重要作用。抗氧化治療是目前防治的重要靶點(diǎn)之一。滇白珠為我國西南地區(qū)使用的草藥，在湖南西部也有分布。研究證明，滇白珠含有機(jī)酸、苷類、黃酮類、木脂素、槲皮素類等多種化合物，具有活血化瘀、通絡(luò)止痛、清熱解毒等功效，用于治療慢性氣管炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)寒感冒等.本研究利用滇白珠水提物干預(yù)COPD大鼠后檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)濃度的變化，探討滇白珠水提物對(duì)COPD氧化應(yīng)激的影響。

　　1材料與方法

　　1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選取雄性SD大鼠36只(湖南省長沙市開福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技服務(wù)部購買，編號(hào)HNACSDC20120292)，鼠齡12周;平均體質(zhì)量(278.0±26.0)g.將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組和用藥組，各12只。

　　1.2COPD模型制備采用氣管內(nèi)兩次注入脂多糖(LPS)和反復(fù)煙熏的方法制作COPD大鼠模型.在第1、14天向3組大鼠氣管內(nèi)緩慢注入LPS200μg(200μl)，將其放入自制的有機(jī)玻璃煙熏箱內(nèi)，在右上角開通1個(gè)直徑1cm的通氣孔。

　　將點(diǎn)燃的香煙(長沙卷煙廠生產(chǎn)的白沙牌香煙)通過三通管將煙霧吸入100ml的注射器中，關(guān)閉吸煙通路一端，再打開三通管的另一端將煙霧注入煙熏箱內(nèi)進(jìn)行大鼠被動(dòng)吸煙，2次/d,16支/次，30min/次，2次間隔4h以上。用藥組吸煙8d后，于每天吸煙前利用灌胃針給大鼠灌滇白珠水提物1.0g/kg,加0.9%氯化鈉溶液至2ml.對(duì)照組于同一時(shí)間灌胃等量0.9%氯化鈉溶液。3組處理時(shí)間均為28d.

　　1.3滇白珠水提物提取滇白珠采集于湖南省湘西鳳凰臘爾山鎮(zhèn)兩林鄉(xiāng)。稱取滇白珠干燥全株800g,切碎，浸泡，水煎3次，30min/次，合并水濾液，濃縮為1g/ml(生藥)，得到滇白珠水提物。

　　1.4支氣管肺泡灌洗液(BALF)收集將大鼠麻醉后仰臥固定于操作臺(tái)，切開胸部后暴露氣管及雙肺，結(jié)扎右主支氣管，用套管針穿刺至左肺，反復(fù)3次緩慢注入3ml無菌0.9%氯化鈉溶液后，回吸并用紗布過濾，得到BALF.

　　1.5SOD活性和MDA濃度測(cè)定試劑盒均購自武漢博士德生物有限公司，檢測(cè)方法按試劑盒說明書進(jìn)行。血漿MDA測(cè)定采用硫代巴比妥酸比色法，酶性抗氧化劑SOD活性測(cè)定采用化學(xué)比色法。

　　1.6病理標(biāo)本處理取右肺下葉，4%中性多聚甲醛固定，石蠟包埋，蘇木精-伊紅染色(HE)，光鏡下觀察形態(tài)學(xué)改變。

　　1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以(x±s)表示，多組間比較采用方差分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2結(jié)果

　　2.1

　　3組肺組織血漿SOD和MDA比較3組肺組織血漿SOD和MDA濃度比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);其中對(duì)照組SOD濃度高于用藥組，用藥組SOD濃度高于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);模型組MDA濃度高于用藥組，用藥組MDA濃度高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,見表1).【表1】

　　2.2

　　3組BALF中SOD和MDA比較3組BALF中SOD和MDA濃度比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);其中對(duì)照組SOD濃度高于用藥組，用藥組SOD濃度高于模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);模型組MDA濃度高于用藥組，用藥組MDA濃度高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,見表2).【表2】

　　2.3病理改變

　　肉眼觀察模型組大鼠可見肺顏色蒼白，體積增大。HE染色光鏡下觀察，可見支氣管黏膜上皮脫落、纖毛倒伏，管壁大量的淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞浸潤，肺泡擴(kuò)張，有大囊泡形成。用藥組大鼠炎癥程度輕，肺泡壁斷裂、大囊泡形成少.

　　3討論

　　目前，COPD的發(fā)病機(jī)制仍未完全闡明，其發(fā)生涉及多個(gè)方面，大量研究表明氧化應(yīng)激在COPD發(fā)生機(jī)制中起到重要作用。氧化應(yīng)激是指由于氧化劑增多和/或抗氧化劑減少導(dǎo)致的氧化/抗氧化失衡狀態(tài)。MDA是氧化過程中最終產(chǎn)物之一，由不飽和脂肪酸分解而來，包含3個(gè)或多個(gè)雙鍵.1997年，我國學(xué)者用動(dòng)物模擬COPD模型證明了血清MDA濃度明顯升高.本研究在建模過程中應(yīng)用滇白珠水提物干預(yù)后發(fā)現(xiàn)用藥組大鼠肺組織血漿和血清MDA濃度較模型組明顯降低，較對(duì)照組升高，表明滇白珠水提物可以減輕COPD氣道氧化損傷，改善慢性炎癥。病理學(xué)切片顯示支氣管和肺組織病理損傷較模型組減輕，說明滇白珠水提物在一定程度阻止COPD病理進(jìn)程。

　　SOD是機(jī)體清除超氧陰離子惟一的抗氧化酶，在一定程度上表示了機(jī)體的抗氧化能力.本研究結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，模型組大鼠BALF和血漿SOD降低、MDA升高，提示存在氧化應(yīng)激損傷。與模型組比較，用滇白珠水提物干預(yù)后的大鼠BALF和血漿MDA降低、SOD升高，從而提示滇白珠水提物在一定程度上能夠改善COPD大鼠的氧化應(yīng)激程度，對(duì)COPD的治療有一定作用。

　　綜上所述，滇白珠水提物可以下調(diào)COPD的MDA表達(dá)，升高SOD活性，減輕和控制氣道氧化應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而控制病情的發(fā)展，為臨床治療COPD提供新的方法和思路。

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