GS試劑制備組織切片的染色效果分析

　　在常規(guī)的病理技術(shù)工作中，常需要對(duì)病理組織樣本進(jìn)行制片染色來(lái)對(duì)其進(jìn)行分析和研究，下面是小編搜集整理的一篇探究GS試劑制備組織切片的染色效果的論文范文，供大家閱讀借鑒。

　　常規(guī)病理技術(shù)常用的固定劑為4%甲醛，脫水、透明的主要試劑為乙醇和二甲苯。已有研究中證實(shí)，常規(guī)病理技術(shù)應(yīng)用中相關(guān)的試劑多具有較強(qiáng)的刺激性和揮發(fā)性，不但病理技術(shù)應(yīng)用存在一定局限，且還會(huì)對(duì)相關(guān)人員的身體健康造成不良影響。因此，尋找一種對(duì)人體無(wú)毒、無(wú)害且安全的替代品已成為病理技術(shù)工作者的一種迫切愿望。本研究分別通過(guò)GS試劑和傳統(tǒng)試劑制備組織切片，并將其分別應(yīng)用在病理自動(dòng)化染色的過(guò)程中，比較不同方法、不同試劑制備的組織切片的染色效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

　　1、資料與方法

　　1.1一般資料選取湘鄉(xiāng)市人民醫(yī)院自2013年5月~2015年2月期間臨床送檢的不同活體組織病理標(biāo)本共計(jì)4014例，包括乳腺、結(jié)直腸、食管、胃、甲狀腺腫物、淋巴結(jié)、皮膚、膽囊、脂肪、子宮宮頸、肝臟、扁桃體及腎穿刺組織等不同部分的新鮮病理組織，每份標(biāo)本都取材2個(gè)組織塊(組織塊的大小為1.5cm×1.0cm×0.2cm)，并分別采用GS環(huán)保套液石蠟制片法和傳統(tǒng)的石蠟制片法對(duì)組織進(jìn)行處理制片(固定、脫水、透明、浸蠟)，然后將其進(jìn)行病理自動(dòng)化染色，將采用GS環(huán)保套液處理的標(biāo)本作為觀察組，將傳統(tǒng)試劑處理的標(biāo)本作為對(duì)照組，比較兩組組織標(biāo)本的制片、染色效果。

　　1.2方法采用同一型號(hào)全自動(dòng)脫水機(jī)、石蠟切片機(jī)、生物組織自動(dòng)包埋機(jī)以及全自動(dòng)染色機(jī)等。GS環(huán)保套液由哈爾濱格林公司研究開(kāi)發(fā)生產(chǎn)的。

　　1.2.1對(duì)照組本組組織樣本所采用的是經(jīng)傳統(tǒng)石蠟制片法制片并采用傳統(tǒng)HE染色法染色方法。制片方法為：采用4%的中性甲醛(或者95%的乙醇和甲醛溶液以9∶1的比例配成固定液)對(duì)組織進(jìn)行固定，經(jīng)乙醇脫水(經(jīng)濃度為70%、80%、95%的乙醇和無(wú)水乙醇進(jìn)行梯度脫水)，二甲苯透明，浸臘后使用石蠟包埋。將其切成4~5μm厚的切片。染色方法為：切片70℃烤片10min;分別使用二甲苯Ⅰ和二甲苯Ⅱ脫蠟各5min,然后使用無(wú)水乙醇、95%乙醇、80%乙醇梯度脫水各2min,自來(lái)水沖洗3min;蘇木精染色8min,自來(lái)水沖洗3min;1%鹽酸分化液分化7s,自來(lái)水沖洗;藍(lán)化液1min,自來(lái)水沖洗1min;1%伊紅染色3min,自來(lái)水沖洗7s;70%乙醇、95%乙醇各10s;無(wú)水乙醇Ⅰ、無(wú)水乙醇Ⅱ各3min;二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ各3min;中性樹(shù)膠封固。

　　1.2.2觀察組本組組織樣本所采用的是經(jīng)過(guò)GS環(huán)保染色試劑制片并采用全自動(dòng)HE染色方法。制片方法為：采用GS無(wú)醛固定液對(duì)組織進(jìn)行固定，分別采用脫水液、透明液、浸蠟液分別進(jìn)行脫水、透明和包埋，采用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片處理。對(duì)于標(biāo)本體積較小的腎穿刺標(biāo)本而言，需要采用手工單獨(dú)處理的方法進(jìn)行制片[1],制片的步驟同上。染色方法為：切片70℃烤片10min;分別使用GS脫蠟液Ⅰ和GS脫蠟液Ⅱ脫蠟5min;然后使用無(wú)水乙醇、95%乙醇脫水各30s,自來(lái)水沖洗2min;蘇木精染色4min,自來(lái)水沖洗1min;1%鹽酸酒精分化5s,自來(lái)水沖洗3min;藍(lán)化液染色1min,自來(lái)水沖洗1min;1%伊紅染色2min,自來(lái)水沖洗10s;除浮染液10s;無(wú)水乙醇1min;除水透明1min;透明1min;無(wú)苯封片膠封固。

　　1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS.17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用例數(shù)(n)表示，計(jì)數(shù)資料組間率(%)的比較采用χ2檢驗(yàn);以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

　　2、結(jié)果

　　4014例患者的病理組織經(jīng)GS環(huán)保套液制片與經(jīng)傳統(tǒng)石蠟制片法制片后，比較其組織切片可見(jiàn)，觀察組經(jīng)GS環(huán)保套液制片的組織切片效果更加良好，均未出現(xiàn)脫水不完全，組織變脆和變硬的情況;2種方法制片后經(jīng)HE染色，經(jīng)GS環(huán)保套液染色的時(shí)間更短(P<0.05)，且經(jīng)HE染色后，染色更加均勻，組織細(xì)胞的結(jié)果清晰，細(xì)胞間的裂隙較少。見(jiàn)表1.

　　3、討論

　　在常規(guī)的病理技術(shù)工作中，常需要對(duì)病理組織樣本進(jìn)行制片染色來(lái)對(duì)其進(jìn)行分析和研究，但是在脫水、固定等過(guò)程中常用的試劑，如甲醛、二甲苯等都具有十分強(qiáng)烈的揮發(fā)性和刺激性[2-5],不僅對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的身體健康會(huì)產(chǎn)生較大的危害，還會(huì)對(duì)環(huán)境造成很大的污染[6].因而，尋找性能穩(wěn)定的能夠代替甲醛、二甲苯等有害試劑的無(wú)毒、環(huán)保試劑對(duì)于病理技術(shù)工作人員和環(huán)境保護(hù)都具有十分重要的意義，GS環(huán)保試劑應(yīng)運(yùn)而生。

　　本研究采用了哈爾濱格林公司[7]開(kāi)發(fā)研制的GS環(huán)保試劑和傳統(tǒng)的甲醛、二甲苯試劑對(duì)不同部位的病理組織標(biāo)本進(jìn)行制片和染色，結(jié)果可見(jiàn)GS試劑不僅在制片過(guò)程中具有更強(qiáng)的滲透性，且能夠有效縮短染色過(guò)程中的脫水時(shí)間，保證組織的細(xì)胞能保持原有的結(jié)構(gòu)，不會(huì)發(fā)生過(guò)度脫水而致收縮的現(xiàn)象;由于GS環(huán)保套液中的蘇木精染液著色迅速，分化后沖洗時(shí)間短，也提高了染液的穩(wěn)定性。在切片的時(shí)候，不論對(duì)切片的厚度要求怎樣，都能發(fā)現(xiàn)切片中的組織染色均勻完整，且在顯微鏡下細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的顏色分明，色澤十分亮麗鮮艷，有利于更加清晰直觀的觀察病理組織的細(xì)胞結(jié)構(gòu)[8].

　　綜上所述，在病理技術(shù)工作中，采用GS環(huán)保試劑代替?zhèn)鹘y(tǒng)的甲醛和二甲苯具有無(wú)毒、無(wú)污染、無(wú)異味釋放的優(yōu)點(diǎn)，染色效果更加滿意，且安全性好，制片和染色時(shí)間短，值得在病理技術(shù)工作中進(jìn)行推廣。

　　參考文獻(xiàn)：

　　[1]郭效忠，苗志風(fēng)，劉春榮，等.GS環(huán)保試劑在病理制片中的應(yīng)用體會(huì)[J].診斷病理學(xué)雜志，2012,7(3)：32.

　　[2]寇雪梅，趙玉瑩.GS環(huán)保套液在病理技術(shù)工作中的應(yīng)用[J].黑龍江醫(yī)學(xué)，2012,36(9)：676-677.

　　[3]田玉旺，朱紅艷，苗金紅，等.GS環(huán)保試劑在病理制片技術(shù)中的應(yīng)用[J].診斷病理學(xué)雜志，2011,18(4)：312-313.

　　[4]宋一民，高冬玲，郝志偉.GS環(huán)保染色套液在病理常規(guī)染色中的應(yīng)用[J].診斷病理學(xué)雜志，2014,21(4)：256.

　　[5]易紅梅，李艷春，鐘仁華，等.GS環(huán)保型試劑在病理技術(shù)工作中的應(yīng)用體會(huì)[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2014,30(4)：463-464.

　　[6]苗金紅，田玉旺，朱紅艷.GS環(huán)保試劑在特殊染色中的應(yīng)用[J].診斷病理學(xué)雜志，2013,20(11)：736-737.

　　[7]朱衛(wèi)國(guó)，劉春玲，寇雪梅，等.格林組織標(biāo)本制備及切片染色套液在病理實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用[J].武警醫(yī)學(xué)，2012,23(7)：610-611.

　　[8]孫廷誼，謝紅建，孔令非.GS試劑在病理自動(dòng)化染色中的應(yīng)用[J].診斷病理學(xué)雜志，2013,20(4)：254-255.

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