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TLR2和TLR4與慢性心功能不全患者免疫球蛋白的相關(guān)性研究
摘要：目的 對(duì)72例慢性心功能不全患者進(jìn)行外周血單核細(xì)胞Toll樣受體2和4的表達(dá)變化與患者體內(nèi)免疫球蛋白指標(biāo)變化的相關(guān)性研究并將所研究的結(jié)果外推至人群性的疾病研究。方法 選取我院的心內(nèi)科接受治療的72例心功能不全患者進(jìn)行回顧性的資料分析，同時(shí)選取35名健康人作為對(duì)照組。使用流式細(xì)胞技術(shù)和德國BN-Ⅱ全自動(dòng)特種蛋白分析儀檢查TLR2、TLR4及免疫球蛋白相關(guān)指標(biāo)，探究其相關(guān)性。結(jié)果 TLR4陽性在外周血單核細(xì)胞中表達(dá)輕微組和嚴(yán)重組較對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05)，TLR2陽性在外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)與IgA和IgG具有正相關(guān)(P<0.05)，TLR4陽性在外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)與IgA具有正相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 TLR2和TLR4與慢性心功能不全患者免疫球蛋白具有相關(guān)性。
關(guān)鍵詞：TLR2;TLR4;慢性心功能不全;免疫球蛋白
Toll樣受體(TLRs)是一種識(shí)別受體，也是機(jī)體在自身與身具有一種保守模式的受體，在天然免疫中具有舉足輕重的作用。TLR2和TLR4是該受體家族中具有一定代表性的受體，它們與機(jī)體的發(fā)生的炎癥以及免疫功能具有一定的聯(lián)系[1]。研究并分析TLR2和TLR4在慢性心功能不全患病人群外周血中CD14+單核細(xì)胞中的表達(dá)，以及該類受體與患者體內(nèi)免疫球蛋白相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性 [2]。并為深入闡明TLR2和TLR4在慢性心功能不全的發(fā)生、發(fā)展的作用提供新的理論基礎(chǔ)。
1資料與方法
1.1一般資料 選取自2013年1月20日～2014年10月20日來我院的心內(nèi)科接受治療的慢性心功能不全患者72例進(jìn)行回顧性的資料分析，所有患者均經(jīng)過Framingham標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定，并且應(yīng)用NTHA進(jìn)行分級(jí)。將1～2級(jí)患者分入輕微組，3～4級(jí)患者分入嚴(yán)重組，同時(shí)選取35名健康人作為對(duì)照組。其中輕微組患者29例，男性患者18例，女性患者11例，年齡38～82歲，平均是(58.4±10.5)歲，嚴(yán)重組患者43例，男性患者23例，女性患者20例，年齡36～85歲，平均是(59.2±11.6)歲，對(duì)照組30例，男性17例，女性13例，年齡39～79歲，平均是(56.4±10.3)歲。三組患者一般資料無明顯差異，具有可比性。
1.2方法
1.2.1流式細(xì)胞染色及受體分析先對(duì)慢性心功能不全患者和正常人進(jìn)行靜脈取血，而后對(duì)其進(jìn)行染色，進(jìn)而使用離心機(jī)進(jìn)行離心5min，棄上清液。采用美國COULTER EPICSALTRA流式細(xì)胞儀檢測樣品。樣品的分析使用cellquest軟件，分析TLR2和TLR4在外周血CD4+單核細(xì)胞表達(dá)的百分率，以及平均熒光強(qiáng)度。
1.2.2免疫球蛋白相關(guān)指標(biāo)檢測先對(duì)慢性心功能不全患者和正常人進(jìn)行空腹靜脈取血，采用德國BN-Ⅱ全自動(dòng)特種蛋白分析儀檢測，應(yīng)用速率散射比濁法檢測蛋白中IgA、IgG以及IgM的水平。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本次研究所取得的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采取t檢驗(yàn)，以(x±s)的形式對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行表示，以P<0.05代表有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1三組TLR2和TLR4在外周血單核細(xì)胞表面表達(dá)水平對(duì)比TLR4+在輕微組和嚴(yán)重組患者測得的外周血的CD14+單核細(xì)胞表面的值差別顯而易見(P<0.05)，并且輕微組和嚴(yán)重組的差別也顯而易見(P<0.05)。
2.2TLR2、TLR4的表達(dá)與免疫球蛋白相關(guān)指標(biāo)的相關(guān)性經(jīng)過資料取證以及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析可知，TLR2陽性在外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)與IgA具有正相關(guān)(r=0.245，P<0.05)，TLR2陽性在外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)與IgG具有正相關(guān)(r=0.346，P<0.05)，TLR4陽性在外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)與lgA具有正相關(guān)(r=0.314，P<0.05)。
3討論
TLR2和TLR4的種類為跨膜受體蛋白，它們的結(jié)構(gòu)由三種成分組成。相對(duì)TLR4而言，TLR2的識(shí)別能力較強(qiáng)，它可以識(shí)別革蘭陽性菌，也可識(shí)別該類細(xì)菌的細(xì)胞壁的固有成分肽聚糖。而TLR4只可以識(shí)別革蘭陰性菌固有的成分脂多糖[3，4]。依據(jù)近期的相關(guān)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，這兩種跨膜受體蛋白可以導(dǎo)致炎性組織損傷，并且TLR4還與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[5]。相對(duì)Toll樣受體家族中其它亞類而言，這兩種蛋白最具有代表性，它們幾近在人體所有細(xì)胞系中表達(dá)，在淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等中均由它們的表達(dá)[6]。并且在心肌細(xì)胞、消化道上皮細(xì)胞中也有分布。
本次研究對(duì)72例慢性心功能不全患者和35例健康人進(jìn)行相關(guān)性研究并將研究的結(jié)果外推至人群性的疾病研究。用流式細(xì)胞技術(shù)檢測72例慢性心功能不全患者外周血單核細(xì)胞中TLR2和TLR4的表達(dá)差異，研究結(jié)果表明，TLR2+在三組患者測得的外周血的CD14+單核細(xì)胞表面的值無差別(P>0.05)，而TLR4+在嚴(yán)重組中的表達(dá)明顯高于輕微組(P<0.05)，并且，嚴(yán)重組和輕微組中的表達(dá)均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。同時(shí)也進(jìn)一步證實(shí)TLR4在外周血單核細(xì)胞中的高度表達(dá)與慢性心功能不全的發(fā)生有一定的關(guān)聯(lián)性。同時(shí)經(jīng)德國BN-Ⅱ全自動(dòng)特種蛋白分析儀的檢測結(jié)果表明，TLR2陽性在外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)與IgA和IgG具有正相關(guān)(P<0.05)，TLR4陽性在外周血單核細(xì)胞中的表達(dá)與IgA具有正相關(guān)(P<0.05)。綜上所述，慢性心功能不全患者體內(nèi)TLR2和TLR4的表達(dá)與免疫球蛋白的相關(guān)指標(biāo)具有一定的聯(lián)系，其中TLR2與IgA和IgG呈正向線性相關(guān)，隨著TLR2的表達(dá)增強(qiáng)，IgA和IgG含量增加。TLR4與IgA呈正向線性相關(guān)，隨著TLR4的表達(dá)增強(qiáng)，IgA含量增加。
參考文獻(xiàn)：
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