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寄生蟲實驗動物保種
人類應(yīng)用殺蟲劑防制蚊蟲已有70年歷史。40年代初二二三問世后,在全球范圍內(nèi)均作為滅蚊的主要殺蟲劑,但不到10年就發(fā)現(xiàn)蚊媒對二二三的抗藥性成為滅蚊的主要障礙。我國在50年代中后期開始大規(guī)模使用有機氯等合成殺蟲劑防制蚊蟲,抗藥性亦隨著殺蟲劑用量的增長和品種的發(fā)展而演變。
目前,庫蚊抗藥性的監(jiān)測和研究報道較多,但有關(guān)嗜人按蚊抗藥性的監(jiān)測和研究較少[1~6]。媒介按蚊對殺蟲劑敏感性監(jiān)測是目前滅蚊防瘧工作的重要內(nèi)容之一。在嗜人按蚊區(qū),進行殺蟲劑敏感性測試,包括WHO推薦的區(qū)分劑量和LT50或LC50測試,是很有必要的。通過定期監(jiān)測,了解蚊群對當時使用的殺蟲劑的敏感程度,抗性的分布和程度,對可能替代的殺蟲劑敏感性以及對已產(chǎn)生抗性的殺蟲劑停止使用后蚊群敏感性恢復(fù)程度,為瘧疾防治合理使用殺蟲劑提供科學(xué)依據(jù)。現(xiàn)將國內(nèi)各地有關(guān)嗜人按蚊對常用殺蟲劑的敏感性監(jiān)測概況介紹如下。
1 試驗材料
1.1 成蟲來源
采集從現(xiàn)場(監(jiān)測點)捕獲嗜人按蚊吸血的成蚊,帶回實驗室產(chǎn)卵孵化幼蟲飼養(yǎng),蛹羽化后24h內(nèi)測定;驕y試前夜捕捉剛吸血之蚊蟲,帶回實驗室飼養(yǎng)至次日上午供測試用,此時胃血消化約在謝拉氏Ⅲ~Ⅳ期。
1.2 試驗藥物
二二三、馬拉硫磷、溴氰菊酯和氯菊酯,含量在95%以上。
1.3 制備藥膜濾紙
98%溴氰菊酯(法國產(chǎn)),按WHO要求制作藥膜濾紙,含溴氰菊酯3.57mg/m2(濃度0.01%),8.93mg/m2(濃度0.025%),或其它濃度。
2 測試方法
參照WHO 585號(1976)、655號(1980)、818號(1992)等技術(shù)報告;劉維德等:“七種病媒蚊類對擬除蟲菊酯抗性分布及防治對策研究”;“我國尖音庫蚊種團抗藥性現(xiàn)狀—兼論半數(shù)致死劑量與區(qū)分劑量的關(guān)系”。論述用蚊蟲敏感品系LT99.9乘2或用死亡率99.9%~100.0%之間的劑量作為檢測蚊類抗藥性的區(qū)分劑量。
2.1 我國區(qū)分劑量法(我國推薦:溴氰菊酯3.57mg/m2,濃度0.01%)
蚊蟲接觸藥膜濾紙30min,恢復(fù)飼養(yǎng)24h,記錄死亡率。死亡率>99%為敏感群體(S),死亡率80%~98%為初步抗性群體(M),死亡率<80%為抗性群體(R),并設(shè)空白對照。
2.2 WHO區(qū)分劑量法(WHO推薦:溴氰菊酯8.93mg/m2,濃度0.025%)
蚊蟲接觸藥膜濾紙60min,恢復(fù)飼養(yǎng)24h,記錄死亡率。設(shè)立對照和評判標準同上。
2.3 半數(shù)致死時間(LT50)測定
即以一種濃度測試不同接觸時間(如15min、25min、35min、45min、55min)。接觸后,將蚊蟲置蚊籠內(nèi)飼養(yǎng)24h,計算死亡率。至少重復(fù)實驗1次,另設(shè)對照。死亡率按Abott公式校正,用回歸分析方法計算LT50及LT95。
3 結(jié)果
3.1 區(qū)分劑量測定結(jié)果
3.1.1 四川的嗜人按蚊對四種殺蟲劑在實驗室和現(xiàn)場測定的結(jié)果 PP′-二二三接觸1h,濃度在10.0g/L以上時,死亡率多數(shù)接近100.0%;在10.0g/L以下,死亡率只有67.78%。溴氰菊酯對實驗室品系,濃度在0.6g/L~2.0g/L之間,接觸30~60min,死亡率最高僅90.48%;現(xiàn)場測試濃度在0.01g/L以上,接觸30~64min,死亡率在90.83%~100.0%。氯菊酯用1.0g/L濃度,接觸60~64min,死亡率為93.33%~100.0%。馬拉硫磷用1.0g/L濃度,接觸16~32min,死亡率為96.30%~100.0%(表1)。
根據(jù)以上結(jié)果,初步建議嗜人按蚊對四種殺蟲劑的區(qū)分劑量如下:PP′-二二三:濃度10g/L,1h;溴氰菊酯,濃度1.0g/L,接觸30min;氯菊酯:濃度1.0g/L,接觸1h;馬拉硫磷:濃度1.0g/L,接觸20min。
3.1.2 湖北省溴氰菊酯3.57mg/m2(濃度0.01%)區(qū)分劑量法測定的結(jié)果 湖北省從1990年開始以15mg/m2溴氰菊酯浸泡蚊帳滅蚊防瘧。1995年調(diào)查結(jié)果表明,中華按蚊、嗜人按蚊成蚊對溴氰菊酯并未出現(xiàn)抗性。以WHO制訂的區(qū)分劑量測試,浸帳4年組和浸帳1年組死亡率無區(qū)別,均為100%。但以我國推薦的區(qū)分劑量測試,雖無抗性群體,敏感群體亦只有2個,初抗群體占調(diào)查點的83%(表1)。這種差異似與兩者的區(qū)分劑量不同有關(guān),我國推薦的溴氰菊酯劑量為3.57mg/m2,WHO推薦的為8.93mg/m2。
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