控制家畜蠕蟲感染的照射疫苗

控制家畜蠕蟲感染的照射疫苗 摘　要　應(yīng)用照射減活的幼蟲疫苗控制由網(wǎng)尾線蟲(Dictyocaulus spp)引起的牛、羊寄生蟲性支氣管炎已有近40年的歷史，其后雖對其它的宿主-寄生蟲系統(tǒng)開展大量的研究，但并未有新的疫苗問世。事實上，抗網(wǎng)尾線蟲疫苗需持續(xù)不斷的自然感染來維護其免疫力。制備活的幼蟲疫苗的困難阻礙了這項研究的進行，本文討論了生產(chǎn)疫苗的困難，提出一了些解決的辦法并對發(fā)展抗其它蠕蟲的照射減活疫苗提出了建議。

　　蠕蟲的抗藥性重新引起人們對非化學(xué)方法控制家畜感染的興趣，包括宿主的遺傳抵抗力、生物防治、放牧管理和疫苗接種等方法。將這些方法同藥正確的聯(lián)合使用，可能是防治蠕蟲感染的最好措施。

　　疫苗可保護易感家畜或減少家畜體內(nèi)的幼蟲數(shù)，從而降低易感動物的感染率。應(yīng)用減活幼蟲疫苗提高機體免疫力是一項值得重新研究的課題。40年前就曾開展過這方面的研究，但現(xiàn)在判斷療效的標(biāo)準(zhǔn)已改變。例如，將疫苗接種同其它方法聯(lián)合應(yīng)用，使得降低蟲荷作用較低的疫苗可能被接受，強調(diào)的重點是降低產(chǎn)卵率，進而能降低牧場的家畜再感染。如果免疫成年家畜能減少牧場中寄生蟲數(shù)，降低幼畜感染疾病的機會，那么對疫苗的研究可不必再集中于更年幼的幼畜。過去曾經(jīng)認(rèn)為制備減活疫苗非常困難且價格昂貴以至不能生產(chǎn)和運輸，然而，應(yīng)用現(xiàn)有的知識，絕大多數(shù)的技術(shù)難題都能被克服。

　　1　照射減活疫苗的進展

　　1.1　照射減適幼蟲疫苗的商業(yè)應(yīng)用

　　盡管在宿主-寄生蟲系統(tǒng)開展了大量有關(guān)減活幼蟲疫苗的研究，并且很多系統(tǒng)表現(xiàn)出很高的保護力，但僅有3種疫苗用于商業(yè)生產(chǎn)。這種3種疫苗是：寄生于牛羊肺的胎生網(wǎng)尾線蟲(Dictyocaulus viviparus)疫苗，寄生于牛羊肺的絲狀網(wǎng)尾線蟲(Dictyocaulus filaria)疫苗和犬鉤蟲(Ancylostoma caninum)疫苗。胎生網(wǎng)尾線蟲疫苗自1959年已商品化。絲狀網(wǎng)尾線蟲疫苗自1965年首次報道后，東歐、中區(qū)、北亞等許多國家都有生產(chǎn)。1973年美國曾生產(chǎn)犬鉤蟲疫苗，雖然技術(shù)上取得了成功，但因為商業(yè)的原因它并未成為有利可圖的產(chǎn)品，1975年已停止生產(chǎn)。

　　1.2　肺線蟲疫苗的歷史

　　自1959年開始研究胎生網(wǎng)尾線蟲疫苗，之后英國格拉斯哥的研究人員對利用照射減活的幼蟲疫苗刺激免疫力方面進行了一系列的研究，40krad劑量的X線照射的幼蟲，每次接種1000條，4周后再接種一次，對再感染能產(chǎn)生高水平的保護力。

　　二十世紀(jì)五十年代末，由網(wǎng)尾線蟲引起的寄生蟲性支氣管炎對英國乳品加工業(yè)來說是很嚴(yán)重的問題，當(dāng)時缺乏治療及預(yù)防此病的藥物，對此病的流行病學(xué)知識也不多，由于少量的蟲荷即可引起發(fā)病，因而該病較易在短期內(nèi)爆發(fā)流行而且難以控制。在這種背景下，疫苗的出現(xiàn)備受青睞并取得了可觀的商業(yè)效益。

　　隨后的三十年，出現(xiàn)了現(xiàn)代的抗蠕蟲藥物，使疫苗的優(yōu)越性受到了影響。晚近，堅持利用藥物作為預(yù)防胃腸道線蟲和肺線蟲感染的一個組成部分也進一步削弱了肺線蟲疫苗的優(yōu)越性。有些農(nóng)場在大部分年份里能利用藥物有效地控制家畜秋季肺線蟲感染。然而，如果初冬天氣溫暖延遲家畜入室時間，仍會暴發(fā)肺線蟲病。由于有效的藥物防治，動物可能不會經(jīng)歷足夠的低水平感染以產(chǎn)生并維持免疫力，因而成年牛仍會患肺線蟲病。

　　由于防治措施的有效性和病畜較過去得到了更有效的治療，導(dǎo)致了胎生網(wǎng)尾線蟲疫苗銷售量下降，但隨之而來是患寄生蟲性支氣管炎的家畜尤其是成年牛增多，盡管近年來疫苗產(chǎn)品銷售量下降，但肺線蟲疫苗仍然是最成功和最有利可圖的。

　　1.3　有前途的照射減活幼蟲疫苗

　　自牛肺線蟲疫苗取得成功后，人們對類似的疫苗能迅速用于控制其它家畜寄生蟲寄予很大希望，并在許多宿主-寄生蟲系統(tǒng)進行了研究，包括捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(Haemonchus contortus)、蛇形毛圓線蟲(Trichostrangylus colubriformis)、尋常圓線蟲(Strongylus vulgaris)、日本血吸蟲和牛血吸蟲。在減少蟲荷方面，尋常圓線蟲照射減活幼蟲疫苗能使馬產(chǎn)生92％的保護力，照射減活的捻轉(zhuǎn)血矛線蟲幼蟲疫苗和毛圓線蟲幼蟲疫苗能使羊分別產(chǎn)生95％和88％以上的保護力。

　　然而，搥轉(zhuǎn)血矛線蟲疫苗僅對7月齡以上的動物產(chǎn)生較高的保護力，而且要求在疫苗接種前動物未受到該蟲的感染，這意味著最易感的家畜的血矛線蟲病流行區(qū)難以通過接種疫苗產(chǎn)生抵抗力。目前很少開展疫苗對成蟲產(chǎn)卵方面的研究，減活疫苗有可能通過降低成蟲產(chǎn)卵率，減輕牧場污染，減少幼年易感動物的感染機會。

　　2　幼蟲疫苗的制備及傳送

　　2.1　幼蟲的制備

　　有關(guān)照射減活幼蟲疫苗爭論的焦點之一是所需幼蟲的數(shù)目。迄今為止，體外培養(yǎng)幼蟲尚未取得成功，仍需保存感染的動物(對吸蟲還需保存螺類中間宿主)來制備幼蟲。

　　對捻轉(zhuǎn)血矛線蟲，每次接種10000條幼蟲(假設(shè)每只動物接種2次，則需2000條幼蟲)。假定人工感染捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的羊每天產(chǎn)糞750克，每克糞便含2500個蟲卵，蟲卵孵化率為60％，那么每圈10只羊，每月一圈，一年所提供的幼蟲足夠接種200000頭羊，此項費用并不太昂貴，也不需很高的技術(shù)。

　　幼蟲培養(yǎng)和制備方法會影響疫苗的保存期。采用普通方法生產(chǎn)犬鉤蟲幼蟲時，幼蟲僅能存活2－4周，如果采用無菌培養(yǎng)技術(shù)，幼蟲可存活12個月。值得一提的是，從糞便中分離的絲狀網(wǎng)尾線蟲的1期幼蟲在水中培養(yǎng)到3期幼蟲，這種疫苗的保存期僅為2周，而胎生網(wǎng)尾線蟲幼蟲在糞便中培養(yǎng)到3期幼蟲，這種疫苗的保存期可達到6周。目前尚不清楚這種現(xiàn)象是蟲種的不同還是培養(yǎng)方法的差異造成的。

　　2.2　照射減活

　　對準(zhǔn)備好的幼蟲，需尋找合適的減活方法，近年來照射減活成為關(guān)注的焦點，其它方法如化學(xué)減活和基因調(diào)控法也是可能和值得研究的。文獻中曾報道過3種照射減活方法：X射線法，γ射線法及紫外線法。早期牛肺線蟲疫苗采用X射線照射減活，然而近年來γ射線法因為更方便而被大多數(shù)學(xué)者采用。紫外線照射已作為一種激活方法用于許多寄生蟲疫苗的研究。

　　不同的學(xué)者采用的照射劑量不同，但40－60kard劑量是公認(rèn)的制備線蟲疫苗的有效劑量。溫度和幼蟲密度的稍許改變對減活的效果也會產(chǎn)生很大的影響。

　　2.3　接種途徑

　　通常采用自然感染途徑接種照射過的幼蟲，改用其它途徑也可能有效。例如，給�？诜�胎生網(wǎng)尾線蟲疫苗，與對照組相比，減蟲率為96.6％，同樣劑量采用皮下包埋法減蟲率為97.8％。

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