針刺對(duì)抑郁癥模型大鼠海馬區(qū)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響

針刺對(duì)抑郁癥模型大鼠海馬區(qū)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響 【摘要】目的 觀察針刺對(duì)抑郁癥模型大鼠的作用機(jī)制。方法 選擇Open-Field法評(píng)分相近的40只成年SD雄性大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、藥物組、針刺組，每組各10只。應(yīng)用分養(yǎng)和長(zhǎng)期不可預(yù)見(jiàn)性中等強(qiáng)度應(yīng)激造成抑郁癥模型大鼠。以O(shè)pen-Field法對(duì)照研究針刺對(duì)慢性應(yīng)激誘導(dǎo)的抑郁癥模型大鼠行為學(xué)的改變；應(yīng)用高效液相電化學(xué)檢測(cè)儀檢測(cè)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)。結(jié)果 針刺組大鼠，在治療第7天的行為學(xué)評(píng)分與正常對(duì)照組之間已經(jīng)無(wú)明顯差異（P＞0.05）；在治療21天時(shí)，與藥物氟西汀組行為學(xué)評(píng)分無(wú)明顯差異（P＞0.05），與模型對(duì)照組大鼠差異存在顯著性（P＜0.01）。而在治療21天后，針刺組大鼠海馬內(nèi)5-HT和NE的含量，與正常組差異無(wú)顯著性（P＞0.05）；與模型對(duì)照組比較，差異存在顯著性（P＜0.05，P＜0.01）。結(jié)論 針刺治療抑郁癥模型大鼠的行為學(xué)異常，其療效與氟西汀相當(dāng)；抑郁癥模型大鼠海馬區(qū)5-HT和NE的含量與Open-field評(píng)分存在相似性；針刺療效與海馬區(qū)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的改變有關(guān)系。

　　【關(guān)鍵詞】針刺治療；抑郁癥；疾病模型；大鼠；行為學(xué)；5-HT；NE

　　Effects of acupuncture on serotonin and norepinephrine in hippocampus of depressed model rats

　【Abstract】Objective To observe how acupuncture affects the mechanism of depression model rats.Methods Using Open-Field method to randomly select 40 adult SD male rats into normal control, model group, drug treatment and acupuncture treatment group, 10 rats per group. Separation, long term unpredictability, medium stimulation techniques were applied to modify rats? behavior. Then using Open-Field method to reflect changes in depressed model rats? behavior between groups treated with acupuncture and control. And the concentration of monoamine neurotransmitters and their metabolites in hippocampus of rat brain were determined by HPLC-ECD. Results Compared with normal control, acupuncture treatment group’s behavior was not different （P＞0.05）on the 7th day after treatment. On the 21th day after treatment, acupuncture treatment group’s behavior was not different （P＞0.05）with drug treatment group, and was more different with model group（P＜0.01）. Compared with normal group on the 21th day of treatment, the concentration of serotonin and norepinephrine in hippocampus of acupuncture treatment group was not different （P＞0.05）, whereas was more different with model group （P＜0.05，P＜0.01）.Conclusion This experiment proved that acupuncture treatment could change the behavior abnormality of depressive model rats. The curative effects is comparable to flouxetine. The changes of the concentration of serotonin and norepinephrine in hippocampus are one of the mechanism.

　　【Key words】acupuncture treatment；depression；disease model；rat；behavior；5 hydroxytryptamine (5-HT);NE

　　自1984年，針灸開(kāi)始介入抑郁癥的治療以來(lái)，取得了確切的臨床療效，但是對(duì)于針刺作用的過(guò)程和機(jī)制研究尚不深入。為了探討針刺在抑郁癥治療中的應(yīng)用規(guī)律，我們觀察了針刺對(duì)抑郁癥模型大鼠海馬區(qū)內(nèi)單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的影響，并與氟西汀（選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑）作對(duì)照�，F(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下。

　　1 材料與方法

　　1.1 動(dòng)物與分組

　　成年SD大鼠，體重180～220g，雄性，南京中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物中心提供。首先用Open-Field法作行為學(xué)評(píng)分，選擇得分相近的40只大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分組。將大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、藥物組、針刺組，共4組，每組10只；正常組每籠飼養(yǎng)5只，模型組及針刺組每籠飼養(yǎng)1只（分養(yǎng)）。

　　1.2 實(shí)驗(yàn)方法

　　1.2.1 復(fù)制模型

　　參考文獻(xiàn)［1］復(fù)制抑郁癥模型：模型組、藥物組、針刺組大鼠，共接受21天各種不同的應(yīng)激，包括冰水游泳（4℃，5min）、熱應(yīng)激（45℃，5min）、禁水（24h）、夾尾（1min）、電擊足底（電壓50mV，每隔15s刺激1次，每次持續(xù)10s，共15次）、搖晃（1次/s，5min）、禁食（24h）和晝夜顛倒等刺激，平均每種刺激各4次。正常組，常規(guī)飼養(yǎng)，不接受任何應(yīng)激性刺激。

　　于實(shí)驗(yàn)第1、21天測(cè)定各大鼠行為學(xué)（水平運(yùn)動(dòng)和垂直運(yùn)動(dòng)）。

　　1.2.2 治療方法（實(shí)驗(yàn)第21天，進(jìn)入治療階段）

　　正常組，繼續(xù)常規(guī)飼養(yǎng)，每籠飼養(yǎng)5只。模型組，繼續(xù)分養(yǎng)，每籠飼養(yǎng)1只；常規(guī)飼料喂養(yǎng)，不予應(yīng)激性刺激，也不予任何治療措施。藥物組，繼續(xù)分養(yǎng)，每籠飼養(yǎng)1只；常規(guī)飼料喂養(yǎng)，不與應(yīng)激性刺激，按照1.8mg/kg給予氟西汀，將藥物溶解于生理鹽水中灌胃。1日1次治療，連續(xù)21天。針刺組，根據(jù)《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》［2］大鼠穴位定位方法，選擇百會(huì)、內(nèi)關(guān)、三陰交，并參照人和動(dòng)物的穴位解剖結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，在華興邦研制的大鼠針灸穴位圖譜基礎(chǔ)上，在大鼠前正中線上，額頂骨縫交界線前方處定位神庭穴。針刺方法：常規(guī)穴位消毒，選用蘇州醫(yī)療用品廠生產(chǎn)的“華佗”牌32號(hào)1.0寸針灸針進(jìn)行治療。百會(huì)穴向前斜刺，神庭穴向上斜刺，進(jìn)針深度約為2mm，內(nèi)關(guān)直刺1mm，三陰交直刺5mm，每穴行均勻捻轉(zhuǎn)刺激30s，留針10min。1日1次治療，連續(xù)21天。

　　分別于實(shí)驗(yàn)第28、35、42天測(cè)定各鼠行為學(xué)的變化。

　　1.3 行為學(xué)測(cè)定

　　Open-Field法［3］測(cè)定大鼠行為學(xué)。本實(shí)驗(yàn)所用敞箱為正方形，長(zhǎng)、寬各80cm，高40cm，底面由面積相等，邊長(zhǎng)16cm的正方形25塊組成，白色內(nèi)面，以動(dòng)物穿越底面的塊數(shù)為水平活動(dòng)（crossing）得分，以直立次數(shù)為垂直活動(dòng)（rearing）得分，每次3min。

　　1.4 高效液相-電化學(xué)（HPLC-EC）技術(shù)與單胺類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)的檢測(cè)

　　1.4.1 試劑

　　去甲腎上腺素酒石酸鹽（NE）、5-羥色胺鹽酸鹽（5-HT）、3-甲氧基-4-羥基苯乙二醇（MHPG）、5-羥吲哚乙酸（5-HIAA）（以上為SIGMA公司產(chǎn)品），乙二胺－四乙酸二鈉（EDTA）（分析純，汕頭金砂化工廠，批號(hào)：010304）、辛烷基磺酸鈉（東京化成工業(yè)株式會(huì)社，批號(hào)：A87509A）、無(wú)水乙酸鈉（分析純，南京化學(xué)試劑廠，批號(hào)：971142）、檸檬酸（分析純，上海榮潤(rùn)化工有限公司，批號(hào)：20010630）、二正丁胺（化學(xué)純，中國(guó)常州市光明生物化學(xué)研究所，批號(hào)：960308）、高氯酸（分析純，上海桃浦化工廠，批號(hào)：0710）、甲醇（一級(jí)品，高效液相色譜專(zhuān)用，江蘇淮陰塑料制品廠精細(xì)化工研究所，批號(hào)：980512），實(shí)驗(yàn)用水為重蒸餾水。

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