翻白草不同方法提取物對(duì)小鼠降血糖作用
翻白草(Potentilla discolor Bunge)為薔薇科委陵菜屬多年生草本植物，根部或干燥全草均可入。全國(guó)各地均有分布，為我國(guó)傳統(tǒng)〔1〕。近年來，民間流行用翻白草治療糖尿病并取得一定的療效。為了解翻白草降血糖作用機(jī)制，開發(fā)糖尿病新藥或品，本研究對(duì)翻白草進(jìn)行提取，按極性不同的3個(gè)部分，利用四氧嘧啶誘導(dǎo)的糖尿病小鼠模型進(jìn)行活性篩選，以確定具有較強(qiáng)降血糖活性的部分。1 與方法
1?1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 昆明種小鼠(雄性)100只(昆明動(dòng)物所)(合格證編號(hào)：滇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物證第2002106號(hào))。
1?2 主要試劑及儀器 四氧嘧啶(美國(guó)Sigma公司)；葡萄糖測(cè)定試劑盒(上海榮盛生物技術(shù)有限公司，批號(hào)20030101)：消渴丸(廣州中一藥業(yè)有限公司，批號(hào)：E01895)；722型光柵分光光度計(jì)(上海分析儀器總廠)。
1?3 方法
1?3?1 樣品提取并初步分離 利用乙醇浸提，乙酸乙酯萃取，D101大孔樹脂柱層析，將翻白草分為I～Ⅲ部分，分別對(duì)應(yīng)D101大孔樹脂水洗脫部分、D101大孔樹脂甲醇洗脫部分、乙酸乙酯萃取物。
1?3?2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物糖尿病模型的`建立〔2，3〕 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重(26±2)g，禁食16h，準(zhǔn)備給予四氧嘧啶造模。四氧嘧啶溶液臨用前配制，濃度為12mg／ml。給藥方式為腹腔注射，劑量120mg/(kg·bw)，一周后，于第8d斷食3h后，眼眶內(nèi)眥采血，離心取上層血清在24h內(nèi)用葡萄糖氧化酶法測(cè)定血糖。取血糖值>12mmol／L的糖尿病模型小鼠分組進(jìn)行翻白草降血糖實(shí)驗(yàn)。
1?3?3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理 取血糖值>12mmol／L的糖尿病模型小鼠54只，正常小鼠10只作為對(duì)照組，共計(jì)64只，分為6組，分為糖尿病模型組(11只)、陽(yáng)性對(duì)照組(10只)和3個(gè)實(shí)驗(yàn)組(各11只)。正常對(duì)照組、糖尿病模型組給予蒸餾水，劑量為每天450mg／(kg·bw)；陽(yáng)性對(duì)照組給予降血糖藥物消渴丸，劑量為3?75g(kg·bw)；3個(gè)實(shí)驗(yàn)組I～Ⅲ分別給予D101大孔樹脂水洗脫物、D101大孔樹脂甲醇洗脫物、乙酸乙酯萃取物，劑量均為每天450mg/(kg·bw)。給藥方式為灌胃，每天1次，時(shí)間30d。30d后，測(cè)血糖值，條件和方法同前。30d內(nèi)每周稱各組小鼠空腹體重，觀察體重變化。
1?3?4 分析 采用SPSS11?0統(tǒng)計(jì)軟件，進(jìn)行方差分析及t。
2 結(jié)果
實(shí)驗(yàn)組Ⅰ、Ⅱ與糖尿病模型組比較，血糖值降低差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0?05)，表明對(duì)糖尿病小鼠降血糖作用不明顯。而消渴丸組與實(shí)驗(yàn)組Ⅲ與糖尿病模型組比較，血糖降低差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0?05)，表明實(shí)驗(yàn)組Ⅲ即乙酸乙酯部分對(duì)糖尿病小鼠有降血糖作用，其降血糖效果與降糖藥物消渴丸類似。因此，可認(rèn)為翻白草降血糖活性成分主要存在于乙酸乙酯部分，將該部分進(jìn)一步研究，見表1。實(shí)驗(yàn)期間，通過對(duì)動(dòng)物體重的觀察可知，糖尿病模型組動(dòng)物體重增長(zhǎng)緩慢，其余各組動(dòng)物體重均穩(wěn)定增長(zhǎng)，但各組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0?05)，可認(rèn)為翻白草各部分對(duì)糖尿病小鼠的體重沒有影響。
表1 翻白草對(duì)糖尿病小鼠血糖水平的影響（略）
注：與糖尿病模型組比較，a P<0?05：與實(shí)驗(yàn)前比較，c P<0?05；與糖尿病模型組比較，b P<0?01；與其余各組比較，d P<0?01
正常小鼠的血糖、體重與正常對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0?05)，可認(rèn)為翻白草的乙酸乙酯部分對(duì)正常小鼠的體重、血糖均無(wú)影響。
3 討論
翻白草的根主要含鞣質(zhì)及黃酮類化合物〔1〕。黃酮類化合物具有多種生理活性，也具有降血糖的活性，其降血糖機(jī)制是多方面的〔4，5〕。提示其降血糖活性成分可能是其中的黃酮類物質(zhì)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，翻白草乙酸乙酯萃取物具有較強(qiáng)的降血糖作用，并且對(duì)正常小鼠的體重、血糖均無(wú)影響。其降血糖活性成分可能是其中的黃酮類物質(zhì)，其降血糖作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。而其余2個(gè)部分未顯示降血糖作用，原因可能是提取分離過程中一些成分發(fā)生損失，或在該劑量下未能顯示降血糖活性。
【參考文獻(xiàn)】
〔1〕 江蘇新院.中藥大詞典［M］.下冊(cè).上海：科學(xué)技術(shù)出版社，1986：2705.
〔2〕 張均田.現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)方法［M］.上冊(cè).北京醫(yī)科大學(xué)中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1998：981-986.
〔3〕 鄭建仙.功能性食品［M］.3卷.北京：中國(guó)輕出版社，1999：484-489.
〔4〕 陳勇，張晴.五羥基黃酮的藥研究近況［J］.中草藥，1998，29(8)：569-570.
〔5〕 王瑋，王琳.黃酮類化合物的研究進(jìn)展［J］.沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2002,4(2)：115-119.
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