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吉祥草與沿階草的比較鑒別論文
當代，論文常用來指進行各個學術(shù)領(lǐng)域的研究和描述學術(shù)研究成果的文章，簡稱之為論文。下面是小編整理的吉祥草與沿階草的比較鑒別論文。一起來看看吧。
吉祥草與沿階草的比較鑒別論文 篇1
【摘要】
【目的】
從植株外觀性狀、顯微結(jié)構(gòu)特征方面鑒別比較百合科植物吉祥草和沿階草，為2種植物的生藥學研究提供參考依據(jù)。
【方法】
采用植物性狀鑒定、顯微鑒定的方法。
【結(jié)果】
吉祥草未見形成肉質(zhì)小塊根，葉表皮細胞長方形，葉脈面積小，頂面觀未見表皮附屬物；葉橫切面上下表皮細胞層以內(nèi)未見機械組織；根莖橫切面髓部不明顯；根橫切面內(nèi)皮層細胞壁均勻增厚；粉末中偶見方晶。沿階草須根中部或先端常膨大形成肉質(zhì)小塊根，葉表皮細胞類圓形，排列疏松，葉脈面積大，葉頂面觀可見鋸形表皮附屬物；葉橫切面上下表皮細胞層以內(nèi)可見1～3列切向延長的機械組織；根莖橫切面髓部明顯；粉末中未見方晶。
【結(jié)論】
吉祥草與沿階草在外觀性狀、顯微結(jié)構(gòu)特征方面的區(qū)別特征可作為2種植物的生藥學鑒別依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】
吉祥草/解剖學和組織學；沿階草/解剖學和組織學；性狀特征
吉祥草為百合科吉祥草Reineckia carnea（Andr.） Kunth，又名洋吉祥草、解暈草、廣東萬年青、松壽蘭、結(jié)實蘭、竹葉草、佛頂珠、竹葉青、玉帶草、九節(jié)蓮、小清膽、小九龍盤、軟筋藤、竹節(jié)傷、竹根七、觀音草、地蜈蚣［1］，是我國西南苗族地區(qū)常用的傳統(tǒng)草藥之一，味甘，性涼，具有清肺止咳、涼血止血、解毒利咽等功效。苗族民間用于治療咳嗽、支氣管炎、肺炎等病癥 ［2］ 。
沿階草為百合科沿階草Ophiopogon japonicus （L.f.） Ker?Gawl.，又名洋韭、馬韭、羊薺、愛韭、禹韭、忍陵、仆壘、隨脂、羊蓍、禹葭、階前草、書帶草、秀墩草。中藥中常用的麥冬，即是沿階草的塊根。其主要功效是滋陰潤燥、清心除煩，主治肺燥干咳，肺癰，陰虛勞嗽，津傷口渴，消渴，心煩失眠，咽喉疼痛，腸燥便秘，血熱吐衄。目前尚未見關(guān)于吉祥草和沿階草在生藥學方面的對比研究，本研究從外觀性狀、顯微結(jié)構(gòu)特征方面鑒別比較2種百合科植物的異同，為2種藥材的生藥學鑒別提供理論依據(jù)�，F(xiàn)報道如下。
1.材料與方法
1.1材料及處理實驗材料均采自廣州中醫(yī)藥大學大學城校區(qū)一號山體，經(jīng)第一作者鑒定分別為百合科植物吉祥草Reineckia carnea（Andr.） Kunth和百合科植物沿階草Ophiopogon japonicus （L.f.） Ker·Gawl.。
1.2主要儀器及試劑BX51型顯微攝像系統(tǒng)（日本Olympus公司），YS100型顯微鏡（日本Nikon公司）SM 21000型體視鏡（日本Nikon公司）；酒精燈、載玻片、蓋玻片、刀片、鑷子、解剖針、水合氯醛、甘油、蒸餾水等。
1.3方法［3］分別制作吉祥草和沿階草2種材料的臘葉標本，葉表皮撕離標本，莖、根的橫切面標本及粉末標本。
1.3.1葉表皮撕離標本的制作取已用蒸餾水軟化的葉片，用鑷子將其表皮撕下，蒸餾水裝片，鏡檢，在顯微鏡下觀察表皮組織特征。
1.3.2莖葉切面標本的制作取新鮮的樣品（莖、葉）徒手切成橫切片，蒸餾水裝片，鏡檢，觀察橫切面的組織特征。
1.3.3粉末裝片的制作分別取新鮮樣品置于40℃烘箱中，烘干后置于銅盅中，研碎后過60目篩，收集粉末，做成水合氯醛透化裝片，鏡檢，觀察粉末組織細胞形態(tài)特征。觀察上述各標本特征并拍照。
2.結(jié)果
2.12種植物外觀性狀特征比較吉祥草與沿階草植物外觀形狀特征區(qū)別見表1、圖1（見彩圖頁第667頁）。表1吉祥草與沿階草植物外觀性狀比較（略）
2.22種植物植物顯微特征比較
2.2.1吉祥草與沿階草葉表皮特征比較見表2、圖2~圖3（見彩圖頁第668頁）。表2吉祥草與沿階草葉表皮特征比較（略）
2.2.2吉祥草與沿階草葉、根莖、須根等橫切面特征比較見表3~表5、圖4~圖5（見彩圖頁第668頁）。表3吉祥草與沿階草植物葉橫切面特征比較（略）表4吉祥草與沿階草根莖橫切面特征比較（略）表5吉祥草與沿階草須根橫切面特征比較（略）
吉祥草沿階草葉線形、線狀披針形或卵狀披針形，光滑無毛，全緣，無柄，長10～40cm，寬0.5～2.5cm；中脈顯著，側(cè)脈與中脈平行。葉片窄長線性，基部有多數(shù)纖維狀的老葉殘基，葉長15～40cm，寬1.5～4cm，葉柄鞘狀，邊緣有薄膜，基部綠白色并稍擴大，平行脈。根莖匍匐生長，長7～45cm，直徑0.3～1.2cm，節(jié)上有膜質(zhì)鱗葉。匍匐生長，長3.2～4.0cm，直徑0.12～0.2cm。根須根直徑0.14～0.2cm，質(zhì)脆，易折，須根未見膨大形成肉質(zhì)小塊根。須根直徑0.1～0.2cm，不易折，須根中部或先端常膨大形成肉質(zhì)小塊根，塊根直徑0.5～1.3cm，長0.3～0.5cm�；ɑǚ枷悖奂t色，花被片合生成管狀，花藥近矩圓形，背部著生，子房瓶狀�；ㄐ。仙�，略下垂，花被片在花盛開時多展開，花藥三角狀披針形，子房半下位。
吉祥草葉頂面觀沿階草葉頂面觀表皮細胞表皮細胞長方形，長42.5～135.0μm，寬8.8～12.8μm，排列緊密，長軸與葉長軸平行。表皮細胞類圓形，排列疏松，直徑1.5～15.3μm。葉脈葉脈面積小，葉脈細胞長方形，長徑52.3～75.2μm，短徑10.2～12.2μm。葉脈面積大，葉脈細胞長方形，細胞壁連珠狀增厚，長徑76.7～194.1μm，短徑14.4～20.2μm。表皮附屬物表皮細胞未見表皮附屬物。表皮細胞具鋸形表皮附屬物。
吉祥草葉橫切面沿階草葉橫切面機械組織上下表皮層以內(nèi)未見機械組織。上下表皮層以內(nèi)可見1～3列切向延長的機械組織，排列較緊密，長徑5.5～9.7μm，短徑3.5～8.3μm。葉肉細胞近葉下表皮處未見橫向延長的葉肉細胞。近葉下表皮處具有一列橫向延長的葉肉細胞，長徑36.4～40.2μm，短徑15.7～23.2μm。
吉祥草根莖橫切面沿階草根莖橫切面表皮細胞表皮細胞類方形，外壁增厚，長徑24.8～29.1μm，短徑18.4～20.5μm，皮層寬廣。表皮為一列薄壁細胞，類六邊形，外壁增厚，長徑25.0～34.0μm，短徑11.6～30.4μm。髓部不明顯。髓大，約占根莖橫切面1/2，細胞類圓形，長徑11.5～42.4μm，短徑9.7～41.5μm。
吉祥草須根橫切面沿階草須根橫切面皮層皮層寬廣，約占根橫切面的3/4。皮層約占根橫切面的1/2。（續(xù)表）吉祥草根橫切面沿階草須根橫切面內(nèi)皮層內(nèi)皮層明顯，細胞類長方形，細胞壁三面增厚，可見明顯凱氏帶，長徑21.8～26.7μm，短徑11.8～20.9μm，具通道細胞。內(nèi)皮層細胞壁均勻增厚，內(nèi)皮層細胞長徑15.5～21.8μm，短徑14.9～18.0μm，具通道細胞。
2.2.3吉祥草與沿階草葉、根莖、須根等粉末特征比較見表6~表8、圖6~圖8（見彩圖頁第668頁）。表6吉祥草與沿階草葉粉末特征比較（略）表7吉祥草與沿階草根莖粉末特征比較（略）表8吉祥草與沿階草須根粉末特征比較（略）
吉祥草葉粉末沿階草葉粉末導(dǎo)管可見網(wǎng)紋、螺紋導(dǎo)管，網(wǎng)紋導(dǎo)管直徑9.4～20.6μm，螺紋導(dǎo)管直徑8.8～14.7μm，環(huán)紋導(dǎo)管少見�？梢娋W(wǎng)紋、螺紋導(dǎo)管，網(wǎng)紋導(dǎo)管直徑17.9～21.1μm，螺紋導(dǎo)管直徑9.7～12.2μm。非腺毛呈線狀。未見。表皮附屬物未見。具鋸形表皮附屬物。
吉祥草根莖粉末沿階草根莖粉末導(dǎo)管可見孔紋、螺紋導(dǎo)管，孔紋導(dǎo)管直徑9.4～20.6μm，螺紋導(dǎo)管直徑8.8～14.7μm�？梢娍准y、螺紋導(dǎo)管，孔紋導(dǎo)管直徑17.9～21.1μm，螺紋導(dǎo)管直徑9.7～12.2μm。鱗葉細胞鱗葉細胞長方形。未見。
吉祥草須根粉末沿階草須根粉末方晶偶見。未見。石細胞未見。石細胞類方形或長方形。
3.討論
本研究通過對2種百合科植物吉祥草與沿階草外觀性狀和顯微特征方面的鑒別比較，顯示出2種植物生藥學鑒別的區(qū)別特征。
3.1兩種植物在外觀性狀方面的區(qū)別吉祥草葉無柄，須根纖長，未見形成肉質(zhì)小塊根，須根著生在根莖膨大的節(jié)上。沿階草葉柄鞘狀，須根中部或先端常膨大形成肉質(zhì)小塊根。
3.2兩種植物在顯微結(jié)構(gòu)特征方面的.區(qū)別吉祥草葉表皮細胞長方形，葉脈面積小，未見表皮附屬物；葉橫切面上下表皮細胞層以內(nèi)未見機械組織；根莖橫切面髓部不明顯；須根橫切面內(nèi)皮層細胞壁均勻增厚；粉末中偶見方晶。沿階草葉表皮細胞類圓形，排列疏松，葉脈面積大，具有鋸形表皮附屬物；葉橫切面上下表皮細胞層以內(nèi)可見1～3列切向延長的機械組織；根莖橫切面髓部明顯；粉末中未見方晶。
綜上所述，吉祥草和沿階草的植株外觀性狀、顯微結(jié)構(gòu)特征的異同點可作為2種植物鑒別研究的參照指標，并可為2種植物的生藥學鑒別研究提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。
【參考文獻】
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�。�3］楊春澍.藥用植物學［M］. 上海:上�？茖W技術(shù)出版社,1997:336．
吉祥草與沿階草的比較鑒別論文 篇2
吉祥草（Reineckia carnea (Andr.) Kunth），又稱小葉萬年青、玉帶草、松壽蘭、觀音草、瑞草等，為百合科吉祥草屬多年生常綠草本植物。清代《花鏡》中對其形態(tài)、習性、栽培及欣賞都有較扼要記述：“吉祥草，叢生畏日，葉似蘭而柔短，四時青綠不凋，夏開小花，內(nèi)白外紫成穗，結(jié)小紅子，但花不易發(fā)，開則主喜，凡候雨過分根種活，不拘水土中或石上俱可栽，性最喜溫，得水即生，取伴孤石靈芝，清供第一。”吉祥草株型飄逸瀟灑，寓意鴻運祥瑞，所以在眾多花草之中尤為醒目，自古以來就很受人們歡迎。
1.生境分布
吉祥草原產(chǎn)中國長江流域以南各省及西南地區(qū)，日本也有分布。現(xiàn)分布在海拔100~3200m的西南、華南、華中（江蘇、浙江、安徽、江西、陜西）等地。今世界各地廣為栽培。吉祥草喜溫暖、濕潤、半陰的環(huán)境，對土壤要求不嚴格，以排水良好肥沃壤土為宜。畏烈日,故夏日宜置于涼棚下。較耐寒, 長江流域尚可露地越冬, 但下雪要防止被雪掩埋。
2.形態(tài)特征
吉祥草是百合科吉祥草屬，多年生常綠草本植物，有匍匐莖。葉簇生于莖頂或莖節(jié)，每簇3~8枚；葉片條形至披針形，長10~38cm，寬0.5~3.5cm，先端漸尖，向下漸狹成柄�；ㄝ汩L5~15cm；穗狀花序長2~6.5cm，上部花有時僅具雄蕊；苞片卵狀三角形，膜質(zhì)，淡褐色或帶紫色；花被片合生成短管狀，上部6裂，裂片長圓形，長5~7mm，稍肉質(zhì)，開花時反卷，粉紅色，花芳香；雄蕊6枚，短于花柱，花絲絲狀，花藥近長圓形，兩端微凹，子房瓶狀，3室。花期9~10月，漿果球形，直徑6~10mm，熟時鮮紅色。
3.吉祥草的園林應(yīng)用
3.1應(yīng)用范圍
3.1.1吉祥草長勢強健，以半陰濕潤處為佳。在長江以南地區(qū)為林下、林緣優(yōu)良的蔭地地被植物，成片栽植，視覺沖擊力強，豐富了園林地被植物景觀種類。
3.1.2吉祥草根系發(fā)達，生長郁閉快，有較好的保水固土性能，故它也適用于朝北的坡地綠化。
3.1.3吉祥草特別適合于自由式設(shè)計的園林綠地中使用，還可用于巖石園做點綴。
3.1.4吉祥草可以作為園林鋪地植物。
3.1.5吉祥草還可作為庭園樹木下、邊角地、假山邊的栽培植物。其葉纖疏如蘭， 經(jīng)冬不枯，特別是開花結(jié)果時綠葉紅果相映, 非常好看。如再與萬年青相配植, 格外動人。
3.1.6花壇上色塊布置。
3.1.7吉祥草與其它植物一起混栽在街頭栽培箱里面。
3.1.8吉祥草可用于花束花籃作配葉，葉冬夏常青, 生趣盎然。
3.1.9盆栽或水培懸吊觀賞, 取其吉祥之意，放置于廳堂、書齋、辦公室窗臺、商場幾架等,供室內(nèi)欣賞很適宜。
3.2應(yīng)用效果
吉祥草為中國長期栽植的花卉,主要用于觀葉。在半陰處不太郁閉的樹叢下生長，形成綠蔭一片，葉叢稠密淺綠，色澤優(yōu)美光澤好，葉形似蘭而柔短，四時青綠而不凋，讓人賞心悅目，是園林植被中不可多得的淺色系列，且其顏色持久性很強,生機盎然,秋末冬初紫紅色花、清香宜人，火紅漿果，萬綠叢中一點紅，四季觀賞性景觀優(yōu)良，綠化效果極好。吉祥草還是很好的地被植物， 杭州“三潭印月”風景區(qū)，林下成片叢植此草，葉叢濃綠, 花紫紅色、具芳香, 漿果火紅, 觀賞效果甚佳。
3.3應(yīng)用優(yōu)點
3.3.1吉祥草是多年生四季常綠的宿根草本花卉，株型典雅，葉片濃綠，觀賞價值和美學價值高。
3.3.2吉祥草具有較為廣泛的適應(yīng)性和較強的抗逆性，耐蔭、耐濕、耐粗放管理。
3.3.3吉祥草覆蓋力和繁殖力強，生長迅速，從而具有更強的自然更新能力，節(jié)約綠化成本。
3.3.4吉祥草具有匍匐性以及良好的可塑性，可以充分利用特殊的'環(huán)境造型。
3.3.5吉祥草很少有病蟲害，開花整齊，管護中可以不用施肥、修剪，管護成本低。
3.3.6吉祥草無論栽植還是管護用水量都很小，節(jié)約水資源。
3.3.7吉祥草具有調(diào)節(jié)氣候，降低噪音，保持水土，凈化空氣功能和藥用價值，具有生態(tài)效益與經(jīng)濟效益雙重功效。
3.4 吉祥草的園林應(yīng)用缺點
3.4.1吉祥草不耐霜凍，經(jīng)霜凍后葉尖多枯黃而影響冬季景觀效果。
3.4.2吉祥草一般不易開花和座果。
3.4.3吉祥草不耐烈日直曬，經(jīng)烈日曝曬會有枯萎現(xiàn)象。
3.4.4吉祥草在礫質(zhì)壤土、沙質(zhì)壤土或較薄土壤之地，需不間斷的水分補給，故它不適宜種植在一些不耐水濕的針葉林下(如馬尾松林、黑松林等)。
吉祥草與沿階草的比較鑒別論文 篇3
摘要：
以矮生沿階草幼嫩莖尖為外植體，進行愈傷組織、叢生芽誘導(dǎo)以及壯苗、生根培養(yǎng)基篩選對比研究，建立矮生沿階草組培快繁體系。結(jié)果表明，采用MS+0.1 mg/L BA+0.1 mg/L KT+1.0 mg/L NAA或MS+0.2 mg/L BA+0.05 mg/L KT+1.0 mg/L NAA，愈傷組織誘導(dǎo)率96%以上，愈傷組織致密、淡黃色；將誘導(dǎo)的愈傷組織接種于MS+25 mg/L BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA或MS+3.0 mg/L BA+0.05 mg/L KT+0.1 mg/L NAA或MS+2.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.1 mg/L NAA培養(yǎng)基中，可分化出較多的叢生芽；叢生芽接種于MS+2.5 mg/L BA+0.1～0.2 mg/L NAA培養(yǎng)基中進行壯苗培養(yǎng)，幼苗生長健壯、色澤良好；適宜矮生沿階草組培苗生根的培養(yǎng)基為 1/4 MS+0. 2 mg/L NAA，外觀表現(xiàn)良好。
關(guān)鍵詞：
矮生沿階草；莖尖；離體培養(yǎng)；植株再生
矮生沿階草（Ophiopogon japonicus f. nanus）是近年來從日本引進的草坪草新品種，為百合科（Liliaceae）沿階草屬（Ophiopogon）多年生常綠草本植物，具耐陰、耐熱、耐寒、常綠等特點，具有較強的觀賞性，可作為四季常綠的草坪地被植物進行開發(fā)利用。隨著對矮生沿階草坪用性狀研究的不斷深入[1]，其作為耐陰植物栽植于風景林下、建筑物遮陽處或復(fù)層綠化帶下層越來越受到重視[2]，在國內(nèi)外綠化產(chǎn)業(yè)中的需求日益旺盛，其種苗工廠化繁殖亦受到重視。矮生沿階草繁殖方法有種子繁殖、分株繁殖、組織培養(yǎng)等，種子繁殖速度較慢，分株繁殖易造成繁殖的種苗質(zhì)量不高，組織培養(yǎng)可以加快其繁殖速度，種苗質(zhì)量較高。我國對矮生沿階草的組培快繁研究較少，僅有史清云等、李晶等對其快繁技術(shù)進行了研究，且二者均是以葉片作為外植體[3-4]。筆者對矮生沿階草進行了多年研究，發(fā)表相關(guān)論文數(shù)篇[5-7]。本研究以矮生沿階草幼嫩莖尖為外植體，從愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織的分化培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)及生根培養(yǎng)等幾方面進行較為系統(tǒng)的研究，建立矮生沿階草組培快繁體系，為快速繁殖優(yōu)良的矮生沿階草種苗提供技術(shù)支持。
1.材料與方法
1.1 供試材料
供試的矮生沿階草材料由江蘇綠苑園林建設(shè)有限公司苗木基地提供，選取1年生的健壯植株，從其基部將萌發(fā)高度約4 cm的幼芽剝離，將全部葉片和根部剪掉，只留約2 mm莖尖作為外植體。
1.2 方法
1.2.1 消毒處理 將外植體置于流水下反復(fù)沖洗0.5 h，加入適量的洗滌劑浸泡0.5 h，邊浸泡邊振蕩，沖洗干凈后移至超凈工作臺進行下一步的消毒處理。先用75%乙醇浸泡 15 s，之后用0.1% HgCl2消毒5 min，無菌水沖洗外植體5次。用滅菌紙將完全消毒好的外植體表面的水分吸干，待用。
1.2.2 愈傷組織的誘導(dǎo) 將消毒好的矮生沿階草幼嫩莖尖接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織（表1）。每種配方接種18瓶，每瓶接種4個外植體。在無菌室條件下，溫度為（25±2） ℃，黑暗培養(yǎng)，2個月后觀察愈傷組織誘導(dǎo)情況，記錄愈傷誘導(dǎo)率，誘導(dǎo)率=（誘導(dǎo)出愈傷組織的外植體數(shù)/接種的外植體數(shù)）×100%。
1.2.3 愈傷組織的分化培養(yǎng) 用優(yōu)選的培養(yǎng)基進行愈傷組織的誘導(dǎo)后，把愈傷組織切成2 mm的小塊，接入分化培養(yǎng)基中進行分化培養(yǎng)（表2），培養(yǎng)條件為溫度（25±2） ℃、光照度1 500～2 000 lx、光照時間10～12 h/d。每種分化培養(yǎng)基配方接種18瓶，每瓶接種5個愈傷組織小塊。經(jīng)過分化培養(yǎng)后在愈傷組織上萌發(fā)出一定數(shù)量的不定芽，2個月后對分化的不定芽進行觀察和統(tǒng)計，計算分化率，分化率=（分化出芽的材料數(shù)/接種的材料數(shù)）×100%。
1.2.4 壯苗培養(yǎng) 由于分化培養(yǎng)出的不定芽幼嫩，有必要進行壯苗培養(yǎng)。將優(yōu)選的分化培養(yǎng)基上分化的不定芽切下接種于壯苗培養(yǎng)基上進行壯苗培養(yǎng)（表3）。每種壯苗培養(yǎng)基配方接種15瓶，每瓶接種4個不定芽（生長一致，高度為5～6 mm）。培養(yǎng)條件：溫度和光照度同愈傷組織的分化培養(yǎng)，光照時間12～15 h/d。1個月后觀察幼苗生長情況。
1.2.5 生根培養(yǎng) 選擇優(yōu)選的壯苗培養(yǎng)基對矮生沿階草的幼苗進行壯苗培養(yǎng)后，把健壯的矮生沿階草無根幼苗轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基上培養(yǎng)（表4）。每種生根培養(yǎng)基配方接種12瓶，每瓶接種5株生長一致的幼苗，培養(yǎng)條件同上。3周后觀察幼苗根系生長情況。
2.結(jié)果與分析
2.1 愈傷組織的誘導(dǎo)
不同的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上的產(chǎn)生的愈傷組織有所不同（表1）。幾種培養(yǎng)基中，配方5和配方2的愈傷組織誘導(dǎo)率較高，分別為99%和96%，愈傷組織均表現(xiàn)為致密、淡黃色。其余配方的愈傷組織誘導(dǎo)率較低，為52%～74%，且誘導(dǎo)出的愈傷組織外觀表現(xiàn)不良，黃色或褐色，嚴重影響不定芽的分化。綜上所述，通過適宜的培養(yǎng)基配方可以使矮生沿階草幼嫩莖尖誘導(dǎo)出大量的愈傷組織，且愈傷組織外觀表現(xiàn)良好，誘導(dǎo)矮生沿階草愈傷組織適宜的培養(yǎng)基配方為MS+0.1 mg/L BA+0.1 mg/L KT+1.0 mg/L NAA或MS+0.2 mg/L BA+0.05 mg/L KT+1.0 mg/L NAA，愈傷組織誘導(dǎo)率96%以上，且外觀表現(xiàn)良好。
2.2 分化培養(yǎng)
不同的培養(yǎng)基對愈傷組織進行培養(yǎng)，分化出的不定芽有所不同（表2）。幾種培養(yǎng)基中，配方3的分化率最高，達到92%；其次是配方6和配方5，分化率分別為88%和86%；且3種培養(yǎng)基分化出的不定芽高度和長勢無明顯差異，高度為0.5～0.6 cm，生長健壯。其余配方的分化率較低，生長一般。因此，適宜的培養(yǎng)基可以使愈傷組織分化出較多的'不定芽，通過本研究可判定，矮生沿階草愈傷組織分化出較多不定芽的培養(yǎng)基為MS+2.5 mg/L BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA或MS+3.0 mg/L BA+0.05 mg/L KT+0.1 mg/L NAA或 MS+2.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.1 mg/L NAA。在優(yōu)選的分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)60 d，將高0.5 cm以上的不定芽從基部剪下，接種至相同的培養(yǎng)基上進行不定芽分化繼代培養(yǎng)。每50 d繼代1次，繼代培養(yǎng)4代后不定芽達到6～7倍，進行壯苗培養(yǎng)。觀察發(fā)現(xiàn)，繼代培養(yǎng)分化的不定芽長勢與愈傷組織分化的不定芽基本一致。endprint
2.3 壯苗培養(yǎng)
不定芽接種于不同的壯苗培養(yǎng)基上表現(xiàn)有所不同（表3）。配方3和配方4幼苗生長最好，高度分別達2.8、2.6 cm，且健壯、色澤深綠色；其次是配方7和配方8，幼苗高度分別為2.0、1.9 cm，但幼苗表現(xiàn)為淡綠色，生長一般；配方5和配方6的幼苗生長最差，高度分別為1.6、1.4 cm，外觀表現(xiàn)為細弱、幼嫩，色澤黃綠色或淡綠色。綜上所述，適宜的壯苗培養(yǎng)基可以使矮生沿階草的不定芽變成健壯、且色澤好的幼苗，由本研究可知，矮生沿階草適宜的壯苗培養(yǎng)基為MS+2.5 mg/L BA+0.1～0.2 mg/L NAA。
2.4 生根培養(yǎng)
把健壯的矮生沿階草無根幼苗轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)（表4）。運用配方5對幼苗進行生根培養(yǎng)時，根系生長最好，長度達1.8 cm，外觀表現(xiàn)為健壯、白色，且平均根數(shù)達到5.7條/株；其次是配方4，根系長度為1.5 cm，外觀表現(xiàn)為較健壯、淡黃色，平均根數(shù)為2.8根/株；其他配方的培養(yǎng)出的組培苗根系長度較短，生長一般、色澤淡黃色或黃褐色。矮生沿階草根系生長的好壞直接影響組培苗移栽成活率的高低，應(yīng)選擇健壯、長度長、具有白色根系的組培苗進行栽培。綜上所述，適宜的生根培養(yǎng)基利于矮生沿階草的幼苗根系的萌發(fā)和生長，由本研究可知，矮生沿階草適宜的生根培養(yǎng)基為1/4MS+0.2 mg/L NAA。
3.討論與結(jié)論
關(guān)于沿階草屬組培方面的研究較多，其中以葉片為外植體誘導(dǎo)愈傷組織者居多，以莖尖為外植體誘導(dǎo)愈傷者的較少。目前，僅有別運清等[8]、鄭志仁等[9]分別以湖北麥冬的莖尖和黑麥冬帶莖尖的幼嫩莖段為外植體的報道。本研究以矮生沿階草的幼嫩莖尖為外植體，為沿階草屬植物的莖尖離體培養(yǎng)提供一定的依據(jù)。
不同的植物器官誘導(dǎo)愈傷組織，其培養(yǎng)基有所不同。以葉片為外植體篩選誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基的研究中，日本矮生沿階草的培養(yǎng)基是MS+1.0 mg/L 2，4-D+0.25 mg/L KT+0.1 mg/L NAA[3]，山麥冬理想的培養(yǎng)基是MS+1.5 mg/L 2，4-D+0.4 mg/L BA+1.0 mg/L NAA[10]。以莖尖為外植體篩選誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基的研究中，湖北麥冬在MS+2.0 mg/L BA+0.2～0.5 mg/L NAA的培養(yǎng)基中能完成愈傷組織的誘導(dǎo)[8]，黑麥冬誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基[9]與湖北麥冬的相似。這些研究表明植物器官誘導(dǎo)愈傷組織需要細胞分裂素和生長素共同作用，且二者比例應(yīng)適當，本研究得出了與此一致的結(jié)論，發(fā)現(xiàn)矮生沿階草莖尖愈傷組織的誘導(dǎo)需要細胞分裂素（BA和KT）和生長素（NAA）的共同作用，二者的比例為0.2～0.25 ∶ 1.0，即需要較低含量的細胞分裂素和較高含量的生長素。本研究以莖尖為外植體誘導(dǎo)愈傷組織，適宜的培養(yǎng)基為MS+0.1 mg/L BA+0.1 mg/L KT+1.0 mg/L NAA或MS+0.2 mg/L BA+0.05 mg/L KT+1.0 mg/L NAA，與別運清等的研究結(jié)果[8-9]有一定的差異，這可能是植物材料本身造成的，本研究采用的是矮生沿階草，而后者采用的是湖北麥冬和黑麥冬。
前人研究表明，色澤淡黃或淡綠色、質(zhì)地緊密的愈傷組織易分化誘導(dǎo)出不定芽，而色澤發(fā)黃或褐色、質(zhì)地疏松的愈傷組織嚴重影響不定芽的分化[11-12]。本研究利用誘導(dǎo)率較高的培養(yǎng)基培養(yǎng)出的愈傷組織色澤淡黃、結(jié)構(gòu)致密，適宜誘導(dǎo)分化出大量的不定芽。
對于愈傷組織的分化培養(yǎng)，亦需要細胞分裂素和生長素的共同作用，與愈傷組織誘導(dǎo)相反，愈傷組織分化需要較高含量的細胞分裂素和較低含量的生長素。通過本研究可知，使矮生沿階草愈傷組織分化出較多不定芽的培養(yǎng)基為MS+2.5 mg/L BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA或MS+3.0 mg/L BA+0.05 mg/L KT+0.1 mg/L NAA或MS+2.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.1 mg/L NAA。這與別運清等的研究結(jié)果[8-9]一致。從篩選出的分化培養(yǎng)基中分析，細胞分裂素的類型亦影響不定芽的分化，高含量的BA和低含量的KT利于分化出不定芽，而BA含量較低和KT含量較高時則不利于不定芽的分化。
經(jīng)過壯苗培養(yǎng)的幼苗用生根培養(yǎng)基培養(yǎng)1個月后可進行煉苗移栽，經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)經(jīng)1/4 MS+0.2 mg/L NAA生根培養(yǎng)基培養(yǎng)的組培苗其成活率高，達95%，而其他生根培養(yǎng)基培養(yǎng)出的組培苗其成活率低，約為36%～65%，這與組培苗根系的數(shù)量、色澤、和長度等有一定的關(guān)系。根系健壯、色澤嫩白、數(shù)量多的幼苗移栽成活率高。
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