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研究梔子苷的鎮(zhèn)痛和抗炎作用
摘要：目的研究梔子苷的鎮(zhèn)痛和抗炎作用。方法小鼠熱板實(shí)驗(yàn)，醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，梔子苷對二甲苯致小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)，梔子苷對醋酸誘發(fā)小鼠毛細(xì)血管通透性實(shí)驗(yàn)，梔子苷對角叉菜膠致小鼠足腫脹實(shí)驗(yàn)等。結(jié)果梔子苷25 mg/kg劑量（P＜0.05）能延長熱刺激所致小鼠痛覺反應(yīng)時(shí)間，梔子苷50 mg/kg劑量組和12.5 mg/kg劑量組對醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)有明顯的抑制作用（P＜0.05），最大扭體次數(shù)減少百分率可達(dá)55%，具有一定的鎮(zhèn)痛作用；梔子苷12.5 mg/kg劑量組（P＜0.05）和25 mg/kg劑量組（P＜0.01）對二甲苯致小鼠耳腫脹均有明顯的抑制作用，梔子苷大劑量（50 mg/溶液kg）組能導(dǎo)致腹腔毛細(xì)血管滲透液的吸光值顯著降低（P＜0.01），即對急性炎癥滲出有較明顯的抑制作用；梔子苷對角叉菜膠致小鼠足腫脹沒有明顯抗炎作用，炎癥滲出液中PGE2的含量與對照組比較無明顯差異，其抗炎作用可能與PGE2釋放沒有關(guān)系。結(jié)論 梔子苷有一定的鎮(zhèn)痛和抗炎作用。
關(guān)鍵詞：梔子苷 鎮(zhèn)痛作用 抗炎作用
梔子是藥食兩用傳統(tǒng)中藥，藥用梔子是茜草科植物梔子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果實(shí)，性寒味苦 ，歸心、肺、三焦經(jīng) ,具有瀉火除煩 、清熱利尿 、涼血解毒之功效。用于熱病心煩 ,黃疸尿赤 ,血淋澀痛 ,血熱吐衄 ,目赤腫痛 ,火毒瘡瘍等證,外治扭挫傷痛。梔子果中含有含環(huán)烯醚萜苷類成分，其中梔子苷(geniposide)含量最高（含量可達(dá)6％），在梔子的藥用效果中起重要作用［1］。本實(shí)驗(yàn)利用梔子黃色素生產(chǎn)過程中的廢液提取和精制梔子苷［2］，主要對精制的梔子苷進(jìn)行了鎮(zhèn)痛和抗炎作用研究［1，2］。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 藥品與試劑杜冷ding，宜昌人福藥業(yè)有限公司產(chǎn)品；梔子苷，本實(shí)驗(yàn)室提取純化［2］；氫化可的松注射液，天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司產(chǎn)品；伊文思藍(lán)，上�；瘜W(xué)試劑采購供應(yīng)站分裝廠產(chǎn)品；角叉菜膠， Sigma公司。
1.1.2 動(dòng)物昆明種小鼠，18～22 g，湖北省動(dòng)物防疫中心提供。
1.2 方法［3，4］
1.2.1 梔子苷對小鼠鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)研究昆明種雌性小鼠40只，隨機(jī)分為 5 組：生理鹽水陰性對照組、梔子苷大劑量組（50 mg/kg）、梔子苷中劑量組（25 mg/kg）、梔子苷小劑量組（12.5 mg/kg）、杜冷ding陽性對照組。分組前進(jìn)行篩選，調(diào)節(jié)小鼠熱板測痛儀，使溫度保持在（55.0±0.2）℃，每次取1只小鼠，放入測痛儀內(nèi)，記錄自放入到出現(xiàn)舔后足所需的時(shí)間(s)作為該鼠的痛閾值。凡小于5 s或大于30 s出現(xiàn)舔后足者，以及喜跳躍者，一律棄去不用。取合格者進(jìn)行分組，標(biāo)記，重新測量兩次，取平均值作為該鼠給藥前的基礎(chǔ)痛閾值。
梔子苷大、中、小劑量組連續(xù)3d 按時(shí)按量皮下注射給藥，給藥1次/d，給藥時(shí)間間隔24h/次。每天給藥前，先稱小鼠體重，按小鼠的體重計(jì)算給藥量后再給藥，陰性對照組給予等量體積的生理鹽水。第4天時(shí)，給藥組稱重后按小鼠體重皮下注射給藥，5組按順序給藥。每組給藥后30，60，90，120 min分別測定小鼠痛閾值。若小鼠在熱板上停留60 s后仍無痛反應(yīng)，則取出，按60s計(jì)算。比較給藥組和對照組的差異情況，作組間t檢驗(yàn)。
1.2.2 梔子苷對醋酸誘發(fā)小鼠扭體反應(yīng)的影響
取昆明種小鼠 40 只，雌雄各半，按性別體重隨機(jī)分為 5 組，每組 8 只，打點(diǎn)標(biāo)記后送入動(dòng)物房飼養(yǎng)。5 組對應(yīng)的分別是：生理鹽水陰性對照組、梔子苷大劑量組（50 mg/kg）、梔子苷中劑量組（25 mg/kg）、梔子苷小劑量組（12.5 mg/kg）、杜冷ding陽性對照組。前3 d給藥同“1.2.1”項(xiàng)。第4天時(shí)，稱完小鼠體重后，空白對照組和給藥組仍然按時(shí)按量皮下注射給藥，并且與前次給藥時(shí)間間隔24 h，杜冷ding陽性對照組最后給藥。依每只小鼠給藥時(shí)間為準(zhǔn)，杜冷ding陽性組小鼠給藥 300 min 后即陰性組及給藥組給藥1h后，腹腔注射0.6%的醋酸溶液0.1 ml/10 g。觀察扭體反應(yīng)并計(jì)算20 min內(nèi)小鼠扭體數(shù)。比較給藥組和對照組的差異情況，作t檢驗(yàn)。
1.2.3 梔子苷對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響
取昆明種小鼠 40 只，雄性，體重 18～22g，按體重隨機(jī)分為 5 組：生理鹽水陰性對照組、梔子苷大劑量組（50 mg/kg）、梔子苷中劑量組（25 mg/kg）、梔子苷小劑量組（12.5 mg/kg）、氫化可的松陽性對照組。每組 8 只，打點(diǎn)標(biāo)記后送入動(dòng)物房飼養(yǎng)。前3 d給藥同“1.2.1”項(xiàng)。第 4 天時(shí)，稱完小鼠體重后，前4組仍然按時(shí)按量皮下注射給藥，并且與前次給藥時(shí)間間隔24 h，氫化可的松陽性對照組最后給藥。以每只小鼠給完藥的時(shí)間為基準(zhǔn)，氫化可的松陽性對照組給藥30 min 后，給藥組給藥1 h后，各組小鼠右耳前后兩面涂抹二甲苯（0.02 ml/只）；以每只小鼠致炎時(shí)間為準(zhǔn)，15 min 后將小鼠脫頸椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用8 mm直徑打孔器于左右耳廓相應(yīng)部位各打一耳片，電子天平稱重。以左右耳片的重量之差作為腫脹度。算出腫脹度和腫脹抑制率（%），并與對照組比較（t檢驗(yàn)）。
1.2.4 梔子苷對醋酸誘發(fā)小鼠毛細(xì)血管通透性的影響
小鼠分組同“1.2.3”項(xiàng)。前 3 d給藥同“1.2.1”項(xiàng)。第4天時(shí)，稱完小鼠體重后，3 個(gè)給藥組及陰性對照組仍然按時(shí)按量皮下注射給藥，并且與前次給藥時(shí)間間隔 24 h 。氫化可的松陽性對照組最后給藥，皮下注射氫化可的松。以每只小鼠給完藥的時(shí)間為基準(zhǔn)，氫化可的松陽性對照組給藥 30 min 后，空白及給藥組給藥 1 h 后，尾靜脈注射 0.5%的伊文思藍(lán)溶液 0.1 ml/10 g 體重，后立即腹腔注射 0.6% 醋酸溶液 0.1 ml/10 g 體重，以注射完醋酸溶液的時(shí)間為基準(zhǔn)，20 min后脫頸椎處死小鼠，剪開腹腔，用8 ml生理鹽水分 4 次清洗腹腔，合并洗滌液，3 000 r/min 離心15 min，取上清液，于 590 nm 處測定其吸光值。
1.2.5 梔子苷對角叉菜膠致小鼠足腫脹的影響
小鼠分組同“1.2.3”項(xiàng)。前3 d給藥同“1.2.1”項(xiàng)。第4天時(shí)，稱完小鼠體重后，空白對照組和3個(gè)給藥組仍然按時(shí)按量皮下注射給藥，并且與前次給藥時(shí)間間隔24 h，氫化可的松陽性對照組最后給藥。依每只小鼠給藥時(shí)間為準(zhǔn)，氫化可的松陽性組小鼠給藥 30 min 后,陰性及給藥組給藥 1 h后致炎，即在每只動(dòng)物右后足注射 1% 角叉菜膠 50 μl 致炎；以每組小鼠致炎時(shí)間為準(zhǔn)，致炎后3 h處死小鼠，稱左、右后足重量，以左、右后足重量的差值作為腫脹厚度。比較給藥組和對照組的差異情況，作t檢驗(yàn)。
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