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探討痛風(fēng)靈膠囊鎮(zhèn)痛作用及機(jī)制
摘要： 目的 觀察痛風(fēng)靈膠囊的鎮(zhèn)痛效果，并探討其作用機(jī)制。 方法 采用熱刺激引起小鼠疼痛反應(yīng)法、冰醋酸刺激引起小鼠扭體反應(yīng)法，以及甲醛法引起小鼠足疼痛反應(yīng),觀察其鎮(zhèn)痛作用，并采用甲醛疼痛模型觀察其對炎癥局部組織中前列腺素(PGE2)的影響。 結(jié)果 痛風(fēng)靈膠囊可以明顯抑制醋酸導(dǎo)致的小鼠扭體反應(yīng), 但對熱刺激所致小鼠疼痛無明顯鎮(zhèn)痛作用，對甲醛所致小鼠第二相反應(yīng)有明顯抑制，降低炎癥組織中的PGE2含量。結(jié)論 痛風(fēng)靈膠囊對外周性疼痛有明顯的鎮(zhèn)痛作用，其機(jī)制與抑制炎癥組織中PGE2生成有關(guān)。關(guān)鍵詞： 痛風(fēng)靈膠囊；鎮(zhèn)痛；前列腺素E2
Abstract:Objective To investigate the analgesic effects and mechanism of Tongfengling(TFL) capsules. Methods Analgesic effects of TFL were observed with pain model mice induced with hot plate, writhing response induced with acetic acid and mouse formalin test. The content of PGE 2 was measured in mouse formalin test. Results TFL capsules could not elevate the pain threshold, but could inhibit writhing response and second phase of formalin test in mice, decreased the concentration of PGE2 in mouse formalin test. Conclusion TFL capsules has obvious analgesic effects, which was related to its inhibitory effects on peripheral inflammatory mediators PGE2.
Key words:Tongfengling capsules ; analgesic effect; prostaglandin(PGE2)
近年來，隨著人民生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，痛風(fēng)的發(fā)病率呈現(xiàn)出不斷上升的趨勢，給人們的生活與工作帶來極大的不便。痛風(fēng)靈膠囊主要由秦艽、防己、延胡索等組成，經(jīng)臨床證實(shí)有明顯的鎮(zhèn)痛療效。為此筆者對痛風(fēng)靈膠囊的鎮(zhèn)痛效果進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，并探討其鎮(zhèn)痛的作用機(jī)制。
1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物NIH小鼠，由廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（合格證號(hào)：2006A017）,符合SPF級標(biāo)準(zhǔn)。
1.2 藥物及試劑痛風(fēng)靈膠囊：本院中藥藥理教研室提供，批號(hào)：20050702。冰醋酸：廣東光華化學(xué)廠有限公司，批號(hào)：20041214。甲醛：汕頭市光華化學(xué)廠，批號(hào)：20040316。羅通定片（30 mg/片）：廣州康和藥業(yè)有限公司，批號(hào)：041001。吲哚美辛腸溶片（25 mg/片）：廣東華南藥業(yè)有限公司，批號(hào)：050801。
1.3 主要儀器YLS-6A型智能熱板儀（山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站）；UV-1800紫外-可見分光光度計(jì)（北京瑞利分析有限公司）。
2 方法
2.1 對熱刺激引起的小鼠疼痛反應(yīng)的影響［1］ 取雌性NIH小鼠，體質(zhì)量18～22 g，依次放入熱板內(nèi)，仔細(xì)觀察并記錄自放入熱板至出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間作為該鼠的痛閾值。凡舔后足時(shí)間小于5 s或大于30 s者則棄之，共測2次，取平均值作為給藥前痛閾值。將篩選合格的小鼠48只隨機(jī)分為4組，分別以生理鹽水、羅通定、痛風(fēng)靈膠囊高劑量、低劑量灌胃，給藥容積為20 mL/kg，1次／d，連續(xù)給藥5 d，末次給藥后1 h、2 h測量痛閾值，比較各組的差異。
2.2 對冰醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)的影響［2］ 取NIH小鼠64只，雌雄各半，體質(zhì)量18~22 g，隨機(jī)分為4組，分別以生理鹽水、吲哚美辛、痛風(fēng)靈膠囊高劑量、 低劑量灌胃，給藥容積為20 mL/kg，1次／d，連續(xù)給藥5 d，于末次給藥后1 h,分別由腹腔注射0.6％醋酸（0.2 mL/只）。觀察15 min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)，比較各組差異。
2.3 對甲醛法小鼠疼痛強(qiáng)度的影響［1］ 取NIH小鼠48只，雌雄各半，體質(zhì)量18~22 g，隨機(jī)分成4組，即生理鹽水組、吲哚美辛陽性對照組、痛風(fēng)靈膠囊高、低劑量組。各實(shí)驗(yàn)組小鼠每日灌胃給藥1次，給藥容積為20 mL/kg，對照組給予等量的生理鹽水，連續(xù)5 d，末次給藥后1 h，各小鼠右后足跖皮下注射2.5％甲醛生理鹽水溶液50 μL/只，立即觀察1 min，10 min,20 min,30 min,40 min時(shí)的疼痛反應(yīng)，每時(shí)間段觀察45 s，記錄該45 s內(nèi)出現(xiàn)的最高痛級，并按分級標(biāo)準(zhǔn)評定受試動(dòng)物的疼痛強(qiáng)度，比較組間差異。評分方法：舔、咬或抖足3分，提足2分，跛行1分，走動(dòng)自如0分。
2.4 對甲醛致小鼠足腫脹組織中PGE2含量的影響［2］ 取NIH小鼠48只，雌雄各半，體質(zhì)量18~22 g，隨機(jī)分成4組，即生理鹽水組、吲哚美辛陽性對照組、痛風(fēng)靈膠囊高、低劑量組，各實(shí)驗(yàn)組小鼠每日灌胃給藥一次，給藥容積為20 mL/kg，對照組給予等量的生理鹽水，連續(xù)5 d，末次給藥后1 h，各小鼠右后足跖皮下注射2.5％甲醛生理鹽水溶液50 μL /只，24 h后處死小鼠，距右踝關(guān)節(jié)上1 cm處剪下右足， 稱重， 剝皮后浸泡于5 mL生理鹽水中1 h， 以1 500 r/min離心10 min，吸取上清液0.5 mL，加入0?5 mol/L氫氧化鈉－甲醇溶液2 mL，在50 ℃水浴箱中水浴異構(gòu)化20 min，加甲醇稀釋至20 mL，于紫外分光光度計(jì)278 nm處測定吸收值，并按下述公式計(jì)算PGE2含量：PGE2含量（μg/g）＝（E278×13.13×Vt×D）/W。比較各組間差異［注：Vt＝PGE2浸泡液總體積，D＝稀釋倍數(shù)，W＝右下肢重量（g）, E278＝278 nm處的吸收值）］。
2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)、方差分析（ANOVA），以P
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