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研究膚癢寧軟膏止癢和抗過敏的作用
摘要: 目的 研究膚癢寧軟膏止癢和抗過敏的作用。方法 觀察膚癢寧對磷酸組胺所致豚鼠皮膚瘙癢的影響,對組胺所致小鼠毛細血管通透性以及2,4? 二硝基氯苯 (DNCB )致小鼠遲發(fā)性過敏反應 (DTH )的影響,探討其抗過敏作用。結果 膚癢寧軟膏中劑量、高劑量組能明顯提高組織胺所致豚鼠致癢閾,并能抑制磷酸組胺致小鼠皮膚毛細血管通透性增加和2,4-二硝基氯苯所致小鼠遲發(fā)性變態(tài)反應。結論 膚癢寧軟膏具有止癢作用,對致炎性物質所致毛細血管通透性增加和Ⅳ型變態(tài)反應有抑制作用。關鍵詞: 膚癢寧軟膏; 止癢; 抗過敏
香鱗毛蕨是鱗毛蕨科鱗毛蕨屬植物,生長于海拔1 000~1 700 m的山坡或巖石縫中,植物略具香味,故稱香鱗毛蕨,分布于東北、華北各省。根據(jù)民間驗方記載,其對多種皮膚病均有良好的治療作用,尤其是對由真菌引起的腳氣、腳癬治療效果非常顯著[1]。香鱗毛蕨的醇提液對真菌具有較好的抑制作用[2],對銀屑病具有一定的治療作用[3]。本研究將香鱗毛蕨的醇提液與適當基質混合制成膚癢寧軟膏,進行止癢和抗過敏作用的研究,為進一步臨床應用提供依據(jù)。
1 材料
1.1 藥物與試劑
膚癢寧軟膏(1 g生藥/g軟膏):由廣東藥學院中藥化學與分析教研室提供;新膚松軟膏:廣東順峰藥業(yè)有限公司生產(chǎn),批號:050928;鹽酸苯海拉明片:北京雙橋制藥公司生產(chǎn),批號:000301;伊文思藍:德國Serva公司進口分裝,批號:871225;磷酸組胺:國藥集團化學試劑有限公司,批號:62014032;丙酮(分析醇):廣東汕頭市西隴化工廠,批號:0601142。
1.2 動物
NIH小鼠,SPF級,合格證號:2006A017,體質量18~22 g;Hartley豚鼠,普通級,合格證號:2007 A005,由廣東省醫(yī)學實驗動物中心提供。
1.3 儀器
低速離心機(北京醫(yī)用離心機廠,型號 LD4?2A),UV?1800紫外-可見光光度計(北京瑞利分析有限公司)。
2 方法與結果
2.1 膚癢寧軟膏對組胺所致豚鼠皮膚瘙癢的影響[4]
取豚鼠50只,雌雄均有,隨機分5組,即基質對照組、新膚松軟膏陽性藥物對照組、膚癢寧軟膏高、中、低劑量組。用8%(ρ)的硫化鈉背部脫毛(約20 cm2),24 h后每天于背部脫毛區(qū)涂藥1次,基質對照組給予等量的基質,1 g/次,連續(xù)3 d,末次給藥后1 h內(nèi)造型致癢;在造型前24 h,右后足脫毛,致癢時將脫毛處用細砂紙擦傷,以輕度滲血為度(面積1 cm×1 cm),每只動物于末次涂藥后1 h,開始在創(chuàng)面處滴0.01%磷酸組胺0.05 mL/只,每隔3 min依次滴質量濃度0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05% 、……遞增濃度,每次0.05 mL/只,直至豚鼠出現(xiàn)回頭舔右后足,以最后出現(xiàn)豚鼠回頭舔右后足時給予的磷酸組胺總量為致癢閾。結果見表1。表1 膚癢寧軟膏對組胺所致豚鼠瘙癢的影響(略)
結果表明膚癢寧軟膏涂藥后,中、高劑量組致癢閾與基質對照組比較差異均有顯著性,表明膚癢寧軟膏能明顯提高組織胺所致豚鼠致癢閾,有明顯的止癢作用。2.2 膚癢寧軟膏對磷酸組胺所致小鼠毛細血管通透性的影響[5]
取NIH小鼠75只,雌雄均有,隨機分5組,即基質對照組、苯海拉明陽性藥物對照組、膚癢寧軟膏高、中、低劑量組。用8%的硫化鈉背部脫毛,24 h后每天于背部脫毛區(qū)涂相應的藥物1次,基質對照組給予等量的基質,0.2 g/次,苯海拉明陽性藥物對照組ig給藥,連續(xù)5 d,末次給藥1 h后尾iv 0.5%依文思藍生理鹽水溶液5 mg/kg,立即于小鼠腹部正中已脫毛皮膚處皮內(nèi)注射0.1%磷酸組胺0.1 mL/只。3 min后脫臼處死動物,剪下藍斑皮膚,剪碎泡于丙酮生理鹽水溶液(體積比7∶3)5 mL中48 h,離心取上清液,用UV?1800紫外-可見光光度計于610 nm波長比色,測定吸收度A。
從表2可見,膚癢寧軟膏高、中劑量組對組織胺引起的小鼠毛細血管通透性增加有非常顯著的降低作用。表2 膚癢寧軟膏對磷酸組胺所致小鼠毛細血管通透性的影響(略)
2.3 對 2,4?二硝基氯苯 (DNCB )致小鼠遲發(fā)性過敏反應 (DTH )的影響[5]
取NIH小鼠60只,隨機分為5組,即基質對照組、新膚松軟膏陽性藥物對照組、膚癢寧軟膏高、中、低劑量組。用8%的硫化鈉背部、腹部脫毛,24 h后腹部用5% 2,4?二硝基氯苯(DNCB)丙酮溶液50 μL致敏,每天于背部脫毛區(qū)涂相應的藥物1次,基質對照組給予等量的基質,0.2 g/次,連續(xù)7 d。末次給藥1 h,各組將1% DNCB均勻涂于小鼠右耳進行攻擊。攻擊24 h后,脫臼處死小鼠,用直徑9 mm打孔器于雙耳對稱部位打取耳片,精密稱重,以左、右耳片重量之差作為腫脹度。同時取小鼠胸腺及脾稱重,分別以每10 g小鼠的脾重(mg)和胸腺重(mg)作為脾指數(shù)和胸腺指數(shù)。結果見表3。表3 膚癢寧軟膏對小鼠遲發(fā)型超敏反應的影響 (略)
從表3可見,膚癢寧軟膏能減輕小鼠耳腫脹度,免疫器官脾指數(shù)和胸腺指數(shù)也明顯減小,表明膚癢寧軟膏對DNCB所致小鼠Ⅳ型變態(tài)反應有非常明顯的抑制作用。
3 討 論
皮膚瘙癢癥是皮膚科常見病,大量研究表明,組胺是一種可以引起皮膚瘙癢的介質,作用于H1受體,引起瘙癢。用低濃度的組胺涂于真皮表面即可引起瘙癢。因此,常用抗組胺類藥物緩解臨床癥狀[6]。本實驗選用豚鼠皮膚磷酸組胺致癢模型來研究膚癢寧軟膏的止癢作用,結果表明膚癢寧軟膏中劑量、高劑量組能明顯提高豚鼠對磷酸組織胺的致癢閾,并對組胺所致小鼠毛細血管通透性增加有顯著抑制作用,說明膚癢寧軟膏具有拮抗組胺的作用,可應用于皮膚瘙癢的對癥治療。同時其對DNCB所致小鼠Ⅳ型變態(tài)反應有非常明顯的抑制作用,而 Ⅳ型變態(tài)反應的遲發(fā)型超敏反應的機理與臨床上接觸性皮炎相似[7], 說明其也可以用于接觸性皮炎的治療,本實驗結果提示膚癢寧軟膏有一定止癢、抗過敏作用,為其臨床應用和進一步研究提供了理論依據(jù)。
【參考文獻】
。1]徐冬英 . 藥用蕨類植物的研究進展[J]. 中醫(yī)藥信息, 1997, 14(4) : 20-21.
。2]沈志濱,馬英麗,江蔚新,等. 香鱗毛蕨對真菌的抑制作用[J].
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