- 相關(guān)推薦
高效液相色譜法測(cè)定咽寶合劑中連翹苷的含量
【摘要】 目的 制備咽寶合劑并對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制。方法 運(yùn)用薄層色譜法鑒別連翹；采用高效液相色譜法進(jìn)行連翹苷的含量控制，色譜柱為Eclipse XDB-C18柱（250mmX4.6mm，5μm ）,流動(dòng)相：氯仿—甲醇（6：1），檢測(cè)波長(zhǎng)：277nm。 結(jié)果 在0.1～0.5g/L濃度范圍內(nèi)連翹苷呈良好的線性關(guān)系，r=0.9999，平均回收率為99.01%，RSD=0.86%(n=5)。結(jié)論 本制備工藝簡(jiǎn)便可行，含量測(cè)定快速準(zhǔn)確，可用于本制劑的質(zhì)量控制。?
【關(guān)鍵詞】 咽寶合劑 薄層色譜法 連翹苷 高效液相色譜法?
?
咽寶合劑為臨床協(xié)定處方，具有清熱解毒、生津利咽之功效，主要用于急性咽炎、急性扁桃體炎及上呼吸道感染等。為更好地控制該品種的質(zhì)量，筆者制定了制備工藝，并對(duì)其質(zhì)量控制方法進(jìn)行了研究，現(xiàn)報(bào)道如下：?
1 儀器與試藥?
LC—2010AHT型高效液相色譜儀（日本島津公司）；LC solution色譜工作站。連翹苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）；咽寶合劑（規(guī)格100ml）；試劑均為分析純。?
2 處方與制備?
2.1 處方?
魚(yú)腥草6200g，石膏（打碎先煎）6 200g，連翹1 800g，蒲公英6 200g，紫蘇葉1 800g，蘆根1 800g，桑葉3 100g，黃芩1 800g，甘草920g，防腐劑適量，共制成10 000ml。?
2.2 制備 ?
取含有揮發(fā)性成分的飲片，用水適量浸泡，充分濕潤(rùn)后，加水過(guò)藥面，煮沸后保持微沸約15min，濾過(guò)，濾液另器保存，取其它飲片，加水浸泡，充分濕潤(rùn)后，與上述藥渣合并，加水過(guò)藥面2～4cm，煎煮2次，第1次保持微沸1～2h，第2次0.5～1h，時(shí)加攪拌，以煮透為度。
用100目篩濾過(guò)，合并兩次濾液，放置沉淀12h以上，取上清液濃縮至適量，加入上述另煎保存的濾液，趁熱加入防腐劑，攪勻，使成全量，分裝，即得。?
3 質(zhì)量控制?
3.1 性狀?
本品為棕褐色液體，味苦而甜。?
3.2 鑒別?
取本品1ml，加甲醇5ml，振搖使溶解，靜置，取上清液，作為供試品溶液。另取連翹對(duì)照藥材0.5g，加甲醇10ml，置水浴上加熱回流20min，濾過(guò)，濾液作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法??［１］?試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5μm，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄板上，以氯仿—甲醇（5：1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱數(shù)分鐘。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
3.3 檢查?
應(yīng)符合合劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定??［２］?。
3.4 含量測(cè)定?
本合劑的連翹中所含的有效成分連翹苷，在高效液相色譜柱分離中很容易和連翹中乃至樣品中所含其它成分分開(kāi)，其化學(xué)性性質(zhì)穩(wěn)定，在277nm紫外區(qū)有最大吸收??［３］?，重現(xiàn)性較好。因此，我們選擇了連翹苷作為指標(biāo)成分，應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定，從而有效控制咽寶合劑的內(nèi)在質(zhì)量。?
3.4.1 色譜條件：色譜柱：Eclipse XDB-C??18?柱（250mmX4.6mm，5μm ）；流動(dòng)相：氯仿—甲醇（6：1）；檢測(cè)波長(zhǎng)：277nm；流速：1ml/min，柱溫：30℃；進(jìn)樣量10μl。?
3.4.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密吸取連翹苷對(duì)照品10mg置于10ml容瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度制成1g/L的連翹苷對(duì)照品溶液。精密吸取1g / L的連翹苷對(duì)照品分別稀釋配成0.1,0.2,0.3,0.4,0.5（lg / L）的連翹苷對(duì)照品溶液，分別進(jìn)樣10μl，每個(gè)濃度重復(fù)6次，測(cè)定每個(gè)濃度的平均色譜峰面積積分值（A）與連翹苷濃度（C）之間的回歸方程為C=7.16X10-8+6.02X10-3，r=0.999。線性回歸曲線說(shuō)明在0.1～0.5g/L濃度范圍內(nèi)連翹苷濃度與色譜峰面積積分值呈良好的線性關(guān)系。?
3.4.3 對(duì)照品溶液的配制：精密稱(chēng)取連翹苷對(duì)照品加甲醇溶液制成每1ml含0.82mg的溶液。?
3.4.4 供試品溶液的制備：精密量取咽寶合劑20ml，離心過(guò)濾，置于50ml圓底燒瓶中，加入氯仿分3次水浴回流萃取，每次萃取20min左右。合并3次氯仿液，水浴蒸干，用甲醇轉(zhuǎn)移至帶塞刻度試管中，蒸干甲醇，精密取1ml甲醇溶解殘?jiān)�，即得供試品溶液�?
3.4.5 陰性對(duì)照溶液的制備：照處方比例自行制備不含連翹苷的陰性對(duì)照樣品，按供試品溶液制備方法制備。以上三種溶液按上述色譜條件進(jìn)樣，測(cè)定結(jié)果表明：陰性對(duì)照在連翹苷峰相應(yīng)的保留時(shí)間處無(wú)干擾。?
3.4.6 精密度試驗(yàn)：精密吸取供試品溶液，按上述色譜條件，測(cè)定其中連翹苷的含量，連續(xù)進(jìn)樣5次，每次10μl，測(cè)定峰面積，結(jié)果RSD=1.07%。?
3.4.7 回收率實(shí)驗(yàn)：精密吸取已知含量的供試品樣品2ml，分別精密加入0.1g/L的lml標(biāo)準(zhǔn)品溶液1ml，搖勻后按含量測(cè)定方法測(cè)定其中連翹苷的含量，結(jié)果平均回收率為99.01%，RSD=0.86%（n=5）。?
3.4.8 樣品測(cè)定結(jié)果：按上述方法，測(cè)定3批樣品連翹苷的含量分別為6.2 103、6.1 376、6.2 201lg/L。?
4 討論?
采用本法測(cè)定咽寶合劑中連翹苷的含量，方法穩(wěn)定可靠，重現(xiàn)性好，可作為控制本制劑質(zhì)量的有效方法。?
參考文獻(xiàn)?
［１］國(guó)家藥典委員會(huì)編 . 中華人民共和國(guó)藥典（一部）［S］.2005年版 . 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄48.?
［2］國(guó)家藥典委員會(huì)編 . 中華人民共和國(guó)藥典（一部）［S］.2005年版 . 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：附錄54.?
［3］張國(guó)剛，徐綏緒 . 高效液相色譜法測(cè)定抗病毒口服液中連翹苷的含量［Ｊ］.中草藥，1998，29（3）：162.
【高效液相色譜法測(cè)定咽寶合劑中連翹苷的含量】相關(guān)文章：
高效液相色譜法測(cè)定芎鉤天麻丸中芍藥苷的含量03-16
談老年咳喘片中淫羊藿苷的含量測(cè)定03-20
高效液相色譜法測(cè)定白花蛇舌草中槲皮素的含量03-29
淺談高效液相色譜法測(cè)定白花蛇舌草中槲皮素的含量03-17
高效液相色譜法測(cè)定普盧利沙星片的含量和有關(guān)物質(zhì)03-18
土壤中氮含量的測(cè)定分析03-01
藥理效應(yīng)法測(cè)定黃芩苷及清熱合劑的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)05-31