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溫通法對S-荷瘤小鼠的抑瘤作用的實驗探試究
摘要：目的 研究溫通法對小鼠s 肉瘤的抑瘤作用，并初步探討其抑瘤機(jī)制，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法 建立昆明種小鼠S 肉瘤模型50個。隨機(jī)分為中藥高劑量組、中藥中劑量組、中藥低劑量組、荷瘤對照組、CTX化療組，通過對比觀測溫通法對小鼠體重、瘤重、肝脾重量及小鼠一般狀況的影響。結(jié)果荷瘤對照組瘤重明顯大于各治療組，與中藥低劑量組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)，與其余各組比較有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．01)，中藥高劑量組、高劑量組胸腺指數(shù)明顯高于荷瘤對照組(P<0，05)，中藥高劑量組、中藥高劑量組脾指數(shù)高于荷瘤對照組(P<0．05)。結(jié)論 中藥治療各組能明顯抑制小鼠sⅢ肉瘤的生長，提高荷瘤小鼠機(jī)體免疫力，并能改善小鼠的一般狀況。
關(guān)鍵詞：溫通法；s 肉瘤；抑瘤作用；免疫調(diào)節(jié)；中醫(yī)腫瘤學(xué)；中醫(yī)腫瘤實驗醫(yī)學(xué)
中醫(yī)認(rèn)為腫瘤的形成與氣滯、痰凝、血瘀等諸多因素有關(guān)，但寒邪外侵、陽氣虧虛乃為其最為重要的根本原因�！鹅`樞·百病始生》對腫瘤之成因及其病變過程的論述最為精當(dāng)：“黃帝日：積之始生，至其已成，奈何?岐伯日：積之始生，得寒乃生，厥乃成積也�！蹦壳埃鄶�(shù)醫(yī)家從熱毒人手，每投以寒涼消解之品，然而近年眾多醫(yī)家臨床發(fā)現(xiàn)很多惡性腫瘤患者具有畏寒乏力，舌淡苔白，脈沉遲無力等陽虛寒凝的臨床表現(xiàn)，投以溫陽散寒藥，每收到較好療效。鑒此，本次實驗確立了以溫通法治療腫瘤的原則，選用溫陽的典型代表中藥附子、干姜、桂枝，以其合劑的灌服小鼠，通過觀測對荷瘤小鼠的抑瘤作用，對免疫器官的影響及小鼠一般狀況進(jìn)行比較，探討溫通法對s 。肉瘤的抑制作用，以期為溫通法在惡性腫瘤領(lǐng)域的進(jìn)一步應(yīng)用提供新的依據(jù)。
1 材料
1．1 動物
昆明種健康小白鼠5O只，雌雄各半，質(zhì)量18～22g，6～8周齡，由河南省實驗動物中心提供。把它們隨機(jī)分為5組，雌雄隨機(jī)，荷瘤對照組、中藥低劑量組、中藥中劑量組、中藥高劑量組、CTX化療組，每組10只。
1．2 瘤株
腹水型SⅢ小鼠瘤株，由河南省(鄭州大學(xué))醫(yī)藥科學(xué)研究所提供。
1．3 藥物及制備
1．3．1 中藥飲片
由河南省中醫(yī)院中藥藥房提供，按附子：干姜：桂枝=2：2：1的比例配制。取中藥飲片置煎煮容器中，加入相當(dāng)于生藥量5倍的冷水浸泡30min，武火煮沸后文火煮30min，過濾；藥渣加冷水繼續(xù)煎煮，武火煮沸后文火煮20min，過濾；合并兩次濾液，60％水浴濃縮，分為低、中、高3個劑量，經(jīng)計算低劑量組相當(dāng)于生藥材1．30g／ml的藥液，中劑量組相當(dāng)于生藥材2．56g／ml的藥液，高劑量相當(dāng)于生藥材3．83g／ml的藥液，冷卻后裝入滅菌藥瓶，置4~C冰箱保存?zhèn)溆谩?br />
1．3．2 注射用環(huán)磷酰胺(CTX)
江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)，規(guī)格：200mg／支。產(chǎn)品批號：07042021�，F(xiàn)配現(xiàn)用。
2 方法
2．1 $18o荷瘤小鼠模型制備
將接種Sl8o第8天的腹水瘤小鼠處死，無菌條件下抽取腹水，用生理鹽水配制成約1×10。個／ml的細(xì)胞懸液，無菌條件下把5組小白鼠于每只左側(cè)腋下皮下注射0．2ml瘤細(xì)胞懸液。
2．2 給藥方法
中藥組：接種昆明鼠24h后中藥組進(jìn)行灌胃，每天1次，0．4ml／只；荷瘤對照組：生理鹽水灌胃，每天1次，0．4ml／只；CTX化療組：接種72h后生理鹽水配制成2mg／ml藥液，腹腔注射30mg／kg，隔日給藥。以上各組均用藥至接種后第1 1天。
2．3 監(jiān)測指標(biāo)
觀察小鼠接種前后的活動性、反應(yīng)靈敏度、聚堆及毛發(fā)情況。末次給藥24h后處死小鼠，小心剝離瘤塊，解剖小鼠，分別用電子天平稱取小鼠體重、瘤重、胸腺及肝、脾重量。
3 統(tǒng)計學(xué)分析
采用SPSS13．0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( ±s)表示，組間比較用單因素方差分析，P<0．01為差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義，P<0．05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
4 結(jié)果
4．1 溫通法對S 荷瘤小鼠瘤重的影響
結(jié)果顯示：溫通法對s 肉瘤生長有明顯的抑制作用，荷瘤對照組瘤重明顯大于各治療組，與中藥低劑量組有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)，與其余各組有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．01)，CTX組瘤重略輕于中藥高劑量組，但差別不顯著，無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0．05)。
4．2 對免疫應(yīng)答的影響
胸腺是T淋巴細(xì)胞分化成熟的中樞免疫器官，脾臟是人體最大的外周免疫器官，也是T、B淋巴細(xì)胞定居和接受抗原刺激后產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要場所，它們與機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫密切相關(guān)。免疫器官重量是反映機(jī)體非特異性免疫功能的重要指標(biāo)H 。實驗結(jié)果顯示：荷瘤對照組的胸腺指數(shù)明顯高于中藥高劑量組，有統(tǒng)計學(xué)意義(P <0．05)；荷瘤對照組的脾指數(shù)明顯高于中藥中劑量組、中藥高劑量組，與中藥高劑量組比較，有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．01)，與中藥中劑量組比較有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05)。
4．3 各組小鼠一般狀況比較
荷瘤對照組：動物活動少，反應(yīng)遲緩，喜聚堆，毛發(fā)疏松無光澤，飲食少。CTX化療組：動物活動少，反應(yīng)遲緩，被毛較疏松欠光澤，飲食量減少。中藥低劑量組：動物活動較少，反應(yīng)較遲緩，喜聚堆，被毛較疏松欠光澤，飲食量好于CTX及荷瘤對照組。中藥中劑量組：動物活動可，反應(yīng)欠靈敏，被毛柔順，飲食量好于CTX及荷瘤對照組。中藥高劑量組：動物較活潑，反應(yīng)靈敏，被毛柔順有光澤，飲食好于其他各組。
5 討論
綜合古代、近代及現(xiàn)代醫(yī)家所述，惡性腫瘤的發(fā)生是由于人體正氣不足，陰陽氣血失調(diào)，臟腑經(jīng)絡(luò)的功能障礙，致使機(jī)體的抗病能力低下，邪氣乘虛而入，氣、血、痰、毒等病邪互結(jié)于體內(nèi)，日久成積而發(fā)瘕瘕積聚�！端貑枴に臍庹{(diào)神大論篇第二》載：“陽強(qiáng)不能密，陰氣乃絕，陰平陽秘，精神乃治，陰陽離決，精氣乃絕。”此論認(rèn)為疾病的根本病理改變是陰陽之氣的失調(diào)所致，積是機(jī)體陽氣虧虛的結(jié)果。陽氣是機(jī)體呈彌散狀態(tài)的營養(yǎng)物質(zhì)，是保證生理活動的動力之源，一旦不足，則不僅易致寒邪侵襲、留滯，而且易致因臟腑功能減弱，出現(xiàn)病理產(chǎn)物，從而引起腫瘤的發(fā)生。
通過本實驗結(jié)果分析，溫通法不但可以直接抑制腫瘤的生長，而且通過影響免疫器官，提高機(jī)體免疫力，從而達(dá)到抑瘤作用。CTX組與中藥組小鼠的抑瘤效果相當(dāng)，但中藥組生存質(zhì)量明顯高于CTX組小鼠及荷瘤對照組小鼠，小鼠的精神狀態(tài)、活動能力、毛發(fā)情況等均好于CTX組和荷瘤對照組，提示中藥組在提高小鼠機(jī)體免疫力方面是化療藥物不可比擬的，顯示了其獨(dú)特的優(yōu)勢，從而為其在臨床上應(yīng)用提供了新的思路和理論依據(jù)。溫陽法對小鼠免疫機(jī)能的影響和其抑瘤作用關(guān)系，尚需要進(jìn)一步的研究來驗證，同時，對于其抑瘤有效成分也有待于深入研究。
本文來自中國代寫碩士論文網(wǎng)，我們?yōu)槟峁└嗟拇T士畢業(yè)論文
參考文獻(xiàn)
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