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人肝癌細(xì)胞系HepG2中survivin-3鑒定及其真核載體構(gòu)建
畢業(yè)論文
| 全部作者： | 徐兵 楊來華 |
| 第1作者單位： | 江蘇省丹陽市中醫(yī)院 |
| 論文摘要： | 目的：鑒定肝癌細(xì)胞系HepG2中survivin異構(gòu)體（survivin varient，SVV varient）并構(gòu)建其真核表達(dá)載體。方法：提取HepG2細(xì)胞總RNA，根據(jù)Gen-Bank內(nèi)survivin 3個(gè)異構(gòu)體核苷酸序列設(shè)計(jì)3條引物對(duì)其進(jìn)行鑒定；設(shè)計(jì)含有BamHⅠ和XhoⅠ雙酶切位點(diǎn)的SVV-3引物，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）擴(kuò)增SVV-3完整編碼區(qū)，擴(kuò)增產(chǎn)物用BamHI 和XhoI 雙酶切后定向克隆到真核細(xì)胞表達(dá)載體pcDNA3.1 中, 序列測定進(jìn)行鑒定。結(jié)果：HepG2細(xì)胞表達(dá)SVV-3、1，SVV-3表達(dá)尤為豐富。對(duì)SVV-3克隆測序，與Gen-Bank報(bào)道完全1致。結(jié)論：成功鑒定出HepG2表達(dá)SVV-3、1，構(gòu)建了SVV-3真核表達(dá)載體，為后續(xù)研究提供更明確的目標(biāo)。 |
| 關(guān)鍵詞： | SVV，真核表達(dá)載體，HepG2 遠(yuǎn)程下載 論文(免費(fèi)PDF論文全文) |
| 發(fā)表日期： | 2007年11月06日 |
| 同行評(píng)議： | 文章題目簡明，準(zhǔn)確反映了研究工作的特定內(nèi)容。摘要4要素明確，重點(diǎn)科學(xué)問題與目的、材料和方法和結(jié)論相符。采用分子生物學(xué)常規(guī)方法（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)），研究了人肝癌細(xì)胞系HepG2中survivin-3 鑒定及其真核載體構(gòu)建。但也存在如下問題：1. HepG2 總RNA 提取及反轉(zhuǎn)錄合成HepG2 總cDNA應(yīng)給出具體引物2.PCR產(chǎn)物長度上存在疑問3.參考文獻(xiàn)相對(duì)陳舊，使得討論部分未能和最新研究成果對(duì)比，所以討論部分不夠深刻。建議修改后發(fā)表 |
| 綜合評(píng)價(jià)： | |
| 修改稿： | |
| 注：同行評(píng)議是由特聘的同行專家給出的評(píng)審意見，綜合評(píng)價(jià)是綜合專家對(duì)論文各要素的評(píng)議得出的數(shù)值，以1至5顆星顯示。 | |
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