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化學(xué)合成siRNA阻斷小鼠骨髓源性不成熟樹突狀細胞GAPDH的表達
畢業(yè)論文
| 全部作者： | 蔡端 顧曉冬 項建斌 陳宗佑 |
| 第1作者單位： | 復(fù)旦大學(xué)附屬華山醫(yī)院 |
| 論文摘要： | 目的 觀察化學(xué)合成siRNA在轉(zhuǎn)錄后水平即mRNA水平降低小鼠不成熟樹突狀細胞基因表達的效率，并對其影響因素進行初步探討。方法 體外取小鼠脛骨和股骨的骨髓，分離、培養(yǎng)不成熟樹突狀細胞，應(yīng)用化學(xué)合成的不同濃度siRNA在LipofectAMINE 2000轉(zhuǎn)染試劑介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染樹突狀細胞，流式細胞儀檢測siRNA的轉(zhuǎn)染效率，RT-PCR檢測小鼠不成熟樹突狀細胞中GAPDH mRNA水平的變化，臺盼藍染色測定各組中培養(yǎng)細胞的存活率。結(jié)果 脂質(zhì)體能夠?qū)⒒瘜W(xué)合成siRNA轉(zhuǎn)入樹突狀細胞中，轉(zhuǎn)染終濃度為100～600nmol/L的siRNA能特異有效地阻斷GAPDH的表達，而轉(zhuǎn)染終濃度為50～400nmol/L的siRNA有利于細胞存活。結(jié)論 siRNA能在不成熟樹突狀細胞內(nèi)啟動RNA干擾作用，適宜濃度的siRNA能在特異有效地阻斷內(nèi)源性基因表達的同時，最大限度地保持細胞活力。 |
| 關(guān)鍵詞： | siRNA；樹突狀細胞；GAPDH；RNA干擾 遠程下載 論文(免費PDF論文全文) |
| 發(fā)表日期： | 2006年10月17日 |
| 同行評議： | （暫時沒有）
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| 綜合評價： | （暫時沒有） |
| 修改稿： |
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