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化學合成siRNA阻斷小鼠骨髓源性不成熟樹突狀細胞GAPDH的表達
畢業(yè)論文
全部作者: | 蔡端 顧曉冬 項建斌 陳宗佑 |
第1作者單位: | 復旦大學附屬華山醫(yī)院 |
論文摘要: | 目的 觀察化學合成siRNA在轉錄后水平即mRNA水平降低小鼠不成熟樹突狀細胞基因表達的效率,并對其影響因素進行初步探討。方法 體外取小鼠脛骨和股骨的骨髓,分離、培養(yǎng)不成熟樹突狀細胞,應用化學合成的不同濃度siRNA在LipofectAMINE 2000轉染試劑介導下轉染樹突狀細胞,流式細胞儀檢測siRNA的轉染效率,RT-PCR檢測小鼠不成熟樹突狀細胞中GAPDH mRNA水平的變化,臺盼藍染色測定各組中培養(yǎng)細胞的存活率。結果 脂質體能夠將化學合成siRNA轉入樹突狀細胞中,轉染終濃度為100~600nmol/L的siRNA能特異有效地阻斷GAPDH的表達,而轉染終濃度為50~400nmol/L的siRNA有利于細胞存活。結論 siRNA能在不成熟樹突狀細胞內啟動RNA干擾作用,適宜濃度的siRNA能在特異有效地阻斷內源性基因表達的同時,最大限度地保持細胞活力。 |
關鍵詞: | siRNA;樹突狀細胞;GAPDH;RNA干擾 遠程下載 論文(免費PDF論文全文) |
發(fā)表日期: | 2006年10月17日 |
同行評議: | (暫時沒有) |
綜合評價: | (暫時沒有) |
修改稿: |
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